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組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒品牌常規(guī)PCR一般是由Taq DNA聚合酶介導(dǎo)的PCR反應(yīng)，操作較為簡便，產(chǎn)物帶有A尾。通過瓊脂糖凝膠電泳對終產(chǎn)物進(jìn)行定性和半定量分析。兼容樣本范圍廣，但保真性低，主要應(yīng)用于常規(guī)重組質(zhì)粒驗證和基因型鑒定等方面。

實驗方法原理

產(chǎn)品僅用于科研此技術(shù)利用PCR技術(shù)能夠在體外進(jìn)行有效的基因重組，而且不需要內(nèi)切酶消化和連接酶處理，可利用這一技術(shù)很快獲得其它依靠限制性內(nèi)切酶消化的方法難以得到的產(chǎn)物。重疊延伸PCR技術(shù)成功的關(guān)鍵是重疊互補引物的設(shè)計。重疊延伸PCR在基因的定點突變、融合基因的構(gòu)建、長片段基因的合成、基因敲除以及目的基因的擴(kuò)增等方面有其廣泛而獨特的應(yīng)用。

實驗材料 基因樣品

儀器、耗材 PCR儀

實驗步驟

1.  以引物a/b進(jìn)行pcr1。

2.  以引物c/d進(jìn)行pcr2。

3.  引物b/c中引入了需要的限制性位點。

4.  混合二者pcr產(chǎn)物，混合以前*回收一下。

5.  進(jìn)行pcr延伸反應(yīng)，只有右面這個可以延伸。

6.  以延伸反應(yīng)的產(chǎn)物為模板，以a/d為引物進(jìn)行pcr。

7.  產(chǎn)物即為所需最終產(chǎn)物。

產(chǎn)品優(yōu)勢

快速簡單

1分鐘操作時間，15分鐘室溫反應(yīng)

通用性強(qiáng)

無需特定的限制性酶切位點或重組位點，PCR或酶切產(chǎn)物都可克隆

無縫克隆

不附加任何多余堿基序列

靈活多變

多至8個片段同時重組，多點突變易如反掌

高效率高通量

轉(zhuǎn)化簡單，陽性率高達(dá)90%以上.

實驗步驟：

技術(shù)特點：

1準(zhǔn)確可靠，臨床雙盲對照試驗＞1000例，結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對，結(jié)果一致性大于99%。

2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。

3快速：整個檢測流程只需3小時。

4簡便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑，使體系配置操作簡便。

5防污染

6高特異性：雙重特異性組成，產(chǎn)品僅用于科研保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需完全配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對，在延伸中產(chǎn)生熒光。

三線鐮孢Anti-KCNIP2 Antibody拉丁屬名: Fusarium tricinctum

阿姆斯特丹曲霉Anti-KCNH2 Antibody拉丁屬名: Aspergillus amstelodami

RP4質(zhì)粒Anti-KCNJ1 Antibody拉丁屬名: RP4

極細(xì)枝孢Anti-KCNJ16 Antibody拉丁屬名: Cladosporium tenuissimum

嗜麥芽黃單胞菌Anti-KCNMA1 Antibody拉丁屬名: Xanthomonas maltophilia

樟疫霉Anti-KDM2A Antibody注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

簡青霉Anti-KCNN4 Antibody注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

Enterobacter sp.Anti-KCNQ1 Antibody拉丁屬名: Enterobacter sp.

鼠李糖乳桿菌Anti-KDM5B Antibody拉丁屬名: Lactobacillus  rhamnosus

平流層芽孢桿菌Anti-KDR Antibody拉丁屬名: Bacillus stratosphericus

黃曲霉Anti-KDM6B Antibody拉丁屬名: Aspergillus flavus

植物乳桿菌植物亞種Anti-KDR Antibody拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum subsp. plantarum

玉米黑粉菌Anti-KDR Antibody拉丁屬名: Ustilago maydis

香菇Anti-KDR Antibody注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

葡萄座腔菌Anti-KIF15 Antibody注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

亞褐鈸孔菌Anti-KEAP1 Antibody注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

*百脈根根瘤菌Anti-KERA Antibody用途: 與銀合歡共生固氮

多主葡萄殼菌Anti-KIBRA/WWC1 Antibody注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒品牌Hotstart Taq酶/Hotstart Taq DNA聚合酶/Hotstart Taq DNA PolymeraseBR，5u/ul，99%500u，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，保存：-20℃

2500u，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

中文名稱： Hotstart Taq酶

其他中文名稱： Hotstart Taq DNA聚合酶

英文名稱： Hotstart Taq DNA Polymerase

產(chǎn)品規(guī)格： BR，5u/ul，99%

包裝： 500U/1KU

分子量：94kDa，單體

級別：BR

純度：≥99%

濃度：5u/ul

活性定義：在74℃、30分鐘內(nèi)，使10nmol脫氧核糖核酸合成滲入多聚核苷酸（吸附在DE-81上）所需的酶量

酶活性分析混合物：25mM TAPS(PH9.3,25℃), 50mM KC1, 2mM MgCL2, 0.2mM各種dATP,dGTP,dTTP, 0.1mM dCTP, 0.75mM活化的鮭魚精DNA和0.4MBq/ML(3H).-dTTP

保存緩沖液組分：20mM Tris-HCL(PH9.0), 1mM DTT, 0.1mM EDTA,100mM KC1, 0.5%(V/V) Tween 20，0.5%(v/v) Nonidet P40和50%(v/v)甘油

10×Hot start PCR Buffer：200mM Tris-HCL(PH8.3,25℃), 200mM KC1, 50mM (NH4)2SO4

抑制劑：陰離子去污劑（脫氧膽酸、肌氨酰和SDS的濃度分別高于0.06、0.02和0.01%時）

失活：酚/氯仿抽提

質(zhì)量控制：相關(guān)測試表明無內(nèi)切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染

功能啟動：熱啟動PCR

性狀：液體。設(shè)計用于增強(qiáng)DNA擴(kuò)增的特異性、敏感性和產(chǎn)量。使用該酶可在室溫配制反應(yīng)體系，使用方便。它是一種化學(xué)修飾的重組Taq DNA Polymerase，蛋白分子氨基酸殘基上增加了熱不穩(wěn)定的封閉基團(tuán)。該酶在室溫下沒有活性，避免形成引物二聚體和非特異性延伸，從而增加DNA擴(kuò)增的特異性。95℃加熱4分鐘可恢復(fù)活性?；罨拿妇哂信cTaq DNA Polymerase相同的功能：催化5——3方向合成DNA，無可檢測的3——5校正外切酶活性，具有較低的5——3外切酶活性。該酶還具有脫氧核糖核酸酶轉(zhuǎn)移活性，在PCR產(chǎn)物的3-端多加11個腺嘌呤，活化前檢測不到這些活性。

用途：生化研究。高產(chǎn)量擴(kuò)增復(fù)雜模板；PCR特異性高-降低錯配效應(yīng)和減少引物二聚體的生成；增強(qiáng)的PCR敏感性；使用方便，室溫配制PCR反應(yīng)體系；擴(kuò)增產(chǎn)物具有3-dA突出末端；熱啟動PCR；高產(chǎn)量擴(kuò)增長達(dá)3kb片段；RT-PCR；特異性擴(kuò)增復(fù)雜cDNA和基因組模板；擴(kuò)增低拷貝DNA模板；實時PCR；多重PCR；制備TA克隆用PCR產(chǎn)物

保存：-20℃，保質(zhì)期1年