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PCR的反應(yīng)條件：

因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。

◇ 循環(huán)次數(shù)

根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小，設(shè)定25～30個循環(huán)。

如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會出現(xiàn)Smear。

◇ Anneal以及Extension

合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預(yù)備實驗可2℃間隔進(jìn)行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進(jìn)行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設(shè)定30秒～1分鐘；當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時，容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外，Extension時間太短時，會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時間太長時，會出現(xiàn)Smear。

產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，產(chǎn)品僅用于科研可同時進(jìn)行多個檢測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

需要注意：
PCR反應(yīng)液請在冰中配制，然后置于PCR反應(yīng)儀上進(jìn)行PCR反應(yīng)。這種冷啟動法（Cool Start Method）與熱啟動法（Hot Start Method）相結(jié)合，更能有效地減少PCR過程中的非特異性反應(yīng)，增強(qiáng)PCR擴(kuò)增的特異性，能得到良好的PCR結(jié)果。

特點優(yōu)勢：

    1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
    2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

    3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

    4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

    5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

使用方法：
注：產(chǎn)品僅用于科研所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1.樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

黃曲霉Anti-THBS1 Antibody拉丁屬名: Aspergillus  flavus

胡椒枯萎病Anti-THBS2 Antibody注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

短波單胞菌屬Anti-THPO Antibody拉丁屬名: Brevundimonas  basaltis

傘枝犁頭霉Anti-THPO Antibody拉丁屬名: Absidia corymbifera

黃褐紋白蟻傘Anti-THPO Antibody注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

乳明串珠菌Anti-THPO Antibody拉丁屬名: Leuconostoc  lactis

串珠鐮孢*Anti-Thrombospondin/THBS1 Antibody拉丁屬名: Fusarium moniliforme Sheldon

白僵菌Anti-THY1 Antibody用途: 害蟲生物防治

新疆斯克爾曼氏菌Anti-THY1 Antibody拉丁屬名: Skermanella  xinjiangensis

奧斯陸莫拉氏菌Anti-THY1 Antibody拉丁屬名: Moraxella osloensis

紅緣層孔菌Anti-THY1 Antibody注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

不等彎孢Anti-TIA1 Antibody拉丁屬名: Curvularia inaequalis

米根霉Anti-TIAM1 Antibody拉丁屬名: Rhizopus  oryzae

膠韌革菌Anti-TICAM1 Antibody注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

金黃色葡萄球菌Anti-TICAM1 Antibody拉丁屬名: aureus

米根霉Anti-TIE1 Antibody拉丁屬名: Rhizopus  oryzae

枯草芽孢桿菌Anti-TICAM1 Antibody拉丁屬名: Bacillus subtilis

球形節(jié)桿菌Anti-TIMM17A Antibody拉丁屬名: Arthrobacter  globiformis
甲型病毒通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)無機(jī)焦磷酸化酶/無機(jī)焦磷酸酶/Inorganic PyrophosphataseBR，500u/mg100U，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，9024-82-2 保存-20℃

500U，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

中文名稱： 無機(jī)焦磷酸化酶

其他中文名稱： 無機(jī)焦磷酸酶

英文名稱： Inorganic Pyrophosphatase

其他英文名稱： Pyrophosphate phosphohydrolase；Pyrophosphatase Inorganic

產(chǎn)品規(guī)格： BR，500u/mg

包裝： 500U/100U

CAS號：9024-82-2

級別：BR

活力：≥500units/mg protein (E1%/280)

活力定義：One unit will liberate 1.0 μmole of inorganic orthophosphate per min at pH 7.2 at 25 °C.

性狀：粉末。酵母提取

用途：生化研究。

保存：-20℃，保質(zhì)期5年