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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3230
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-02-11
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3230 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
衣氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Actinomyces israelii | LZR3230 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
油橄欖生曲霉CSF2Rβ (Colony Stimulating Factor 2 Receptor Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus olivicola
分枝農(nóng)霉菌CA3 (Carbonic Anhydrase III, Muscle Specific) ELISA Kit拉丁屬名: Agromyces ramosus
楚氏喜鹽芽孢桿菌AIRA (Anti-Insulin Receptor Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Halobacillus trueperi
芽孢桿菌CYP1A1 (Cytochrome P450, family 1, subfamily A, polypeptide 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus atrophaeus
山扁豆生棒孢CYP1A2 (Cytochrome P450, family 1, subfamily A, polypeptide 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
瑞氏青霉AKA (Anti-Keratin Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium raistrickii
大麗花輪枝孢DCLK1 (Doublecortin Like Kinase 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
葡枝根霉DPYD (Dihydropyrimidine Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus stolonifer
研究團(tuán)隊(duì)節(jié)桿菌DSE (Dermatan Sulfate Epimerase) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter arilaitensis
芽孢八疊球菌屬EPYC (Epiphycan) ELISA Kit拉丁屬名: Sporosarcina sp.
乳酒假絲酵母FABP8 (Fatty Acid Binding Protein 8, Myelin) ELISA Kit拉丁屬名: Candida kefyr
玫煙色棒束孢FADS2 (Fatty Acid Desaturase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Isaria fumosorosea
秀珍菇FAIM3 (Fas Apoptotic Inhibitory Molecule 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
冷溫木拉克酵母FASN (Fatty Acid Synthase) ELISA Kit拉丁屬名: Mrakia frigida
樹脂殼菌FBLN4 (Fibulin 4) ELISA Kit拉丁屬名: Resinicium granulare
衣氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格CKLF1 趨化素樣蛋白5,7-二羥基色原酮 7-蕓香糖苷5,7-Dihydroxychromone 7-rutinoside化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
ART(Artemin)(抗原) 馬兜鈴酸CAristolochic acid C中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H9NO7 分 子 量: 327.24516
AATK peptide 細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪氨酸激酶抗原人參皂苷Rh1Ginsenoside Rh1中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H62O9 分 子 量: 638.87208
AQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2（抗原）甘草黃酮C4',5,7-trihydroxy-8-prenylflavone化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H18O5 分 子 量: 338.35392
ABCA1(ATP binding cassette transporter A1) 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗原乙酰胺Acetamide對(duì)照藥材 分 子 式: C2H5NO 分 子 量: 59.0672
TFPI/LACI 組織因子途徑抑制劑巖大戟內(nèi)酯BJolkinolide B中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H35N3O.2[HNO2] 分 子 量: 439.54898
GLUT12 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12胭脂蟲酸3-(Benzoyloxy)-2-(methoxycarbonyl)-8-azabicyclo[3.2.1]octane-8-carboxylic acid對(duì)照藥材 分 子 式: C17H19NO6 分 子 量: 333.33586
