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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3248
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-02-11
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3248 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
阿菲波菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Afipia spp. | LZR3248 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
黑曲霉CENPB (Centromere Protein B) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
蘋果黑腐皮殼CEP110 (Centrosomal Protein 110kDa) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
茄鏈格孢菌CA5B (Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
根瘤菌CFL1(Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit用途: 與紫穗槐共生固氮
三葉草根瘤菌V-Fos FBJ Murine Osteosarcoma Viral Oncogene Homolog (FOS) ELISA Kit用途: 與白三葉草共生固氮
平菇MUC21 (Mucin 21) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸埃希氏菌CPN10 (Chaperonin 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
雞傷寒沙門氏菌CHEM(Chemerin) ELISA Kit 拉丁屬名: gallinarum
貝葉多孔菌CCL1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit用途: 食用兼藥用
樟疫霉CCL14 (Chemokine C-C-Motif Ligand 14) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鏈格孢菌CCL16 (Chemokine C-C-Motif Ligand 16) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物
白色鏈霉菌白色亞種CCL3L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces albus subsp. albus
陰溝腸桿菌CCL4L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 4 Like Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterobacter cloacae
小孢根霉少孢變種CCR8 (Chemokine C-C-Motif Receptor 8) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. oligosporus
碳纖維單胞菌CCRL1 (Chemokine C-C-Motif Receptor Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Cellulomonas carbonis
阿菲波菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商GLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2（抗原）Delta 5-avenasterolStigmasta-5,24(28)-dien-3-ol,(3b)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H48O 分 子 量: 412.69082
ANP(atrial natriuretic peptide) 心鈉肽（心鈉素）抗原二氫歐山芹素columbianetin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C14H14O4 分 子 量: 246.261
GFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4（抗原）柘樹口山酮 ACudratricusxanthone-A對照藥材 分 子 式: C23H24O6 分 子 量: 396.43306
GHRF (GHRH) 生長激素釋放激素（因子）（抗原）雞屎藤次苷(1S,4aS,5R,7aS)-1-(beta-D-glucopyranosyloxy)-5-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-1,4a,5,7a-tetrahydrocyclopenta[c]pyran-4-carboxylic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H22O11 分 子 量: 390.33928
ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1) 位蛋白樣1/生成素樣蛋白-1抗原核酸助沉劑(Glycogen,20mg/ml)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
GLUT4(Glucose transporter type 4) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4（抗原）1-乙氧基羰基-beta-咔啉9H-Pyrido[3,4-b]indole-1-carboxylic acid ethyl ester化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C14H12N2O2 分 子 量: 240.25728
GIP (Gastric Inhibitory polypeptide) 胃泌素抑制肽（抗原）花椒堿Fagarine對照藥材 分 子 式: C13H11NO3 分 子 量: 229.23134
