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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數據分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

青霉FGFBP1 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）FGFBP2 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Flammulina velutipes

大腸埃希菌FRS2 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 2) ELISA Kit拉丁屬名: coli

牛瘟病毒FRS3 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Rinderpest       virus

芽孢桿菌VLA (Very Late Appearing Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.

異常漢遜酵母PRF1 (Perforin 1/Pore-Forming Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Hansenula  anomala

蘇云金芽孢桿菌錫盧亞種FSHR (Follicle Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

甲基桿菌屬VMA (Vanillylmandelic Acid) ELISA Kit拉丁屬名: Methylobacterium  organophilum

根瘤菌TGM1 (Transglutaminase 1, Keratinocyte) ELISA Kit用途: 固氮

寄生曲霉PACAPR (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus  parasiticus

偽假蒼黃菌EPHA10 (Ephrin Type A Receptor 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudoclavibacter helvolus

多主葡萄殼菌ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

無二酸檸檬酸桿菌ERα (Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Citrobacter amalonaticus

木賊鐮孢菌EIPS2 (Estrogen Induced Protein pS2) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium equiseti

香菇EFNA5 (Ephrin A5) ELISA Kit 拉丁屬名: Lentinula edodes
節(jié)桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格CaMK2b(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II beita)  鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2b抗原瓜子金皂苷己Polygalasaponin F中藥標準品  分 子 式: C53H86O23 分 子 量: 1090.24

CAP1/Park7/DJ-1  Park7/DJ-1/CAP1抗原大果桉醛 HMacrocarpal-H對照藥材 分 子 式: C28H40O6 分 子 量: 472.6136

CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2)  環(huán)化酶相關蛋白CAP-2抗原4-甲基七葉亭4-Methyl-6,7-dihydroxycoumarin化學標準品 分 子 式: C10H8O4 分 子 量: 192.16812

TGF beta 2 Propeptide  轉移生長因子–β2前體肽熊果苷Arbutin中藥標準品  分 子 式: C12H16O7 分 子 量: 272.25

TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3)  轉移生長因子–β3（抗原）相思子堿(S)-2-Amino-3-(1-methyl-1H-indol-3-yl)propanoic acid中藥標準品  分 子 式: C12H14N2O2 分 子 量: 218.25176

TGF- Beta R2 peptide  轉移生長因子β受體2（多肽抗原）人參皂苷Rb1ginsenoside rb1中藥標準品  分 子 式: C54H92O23 分 子 量: 1109.29

Thymosin Alpha-1  胸腺肽 α-1 （胸腺肽-Thymosin alpha-1）異姜花素DIsocoronarin D對照藥材 分 子 式: C20H30O3 分 子 量: 318.4504