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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
寄生曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3280
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-02-11
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3280
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

寄生曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商

Aspergillus parasiticus

LZR3280

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

果形正青霉M-AChR M1 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M1) ELISA Kit拉丁屬名: Eupenicillium  meloforme

假結(jié)核耶爾森氏菌M-AChR M2 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M2) ELISA Kit拉丁屬名: Yersinia Pseudotuberculosis

土地桿菌M-AChR M3 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M3) ELISA Kit拉丁屬名: Pedobacter  roseus

哈茨木霉D1R/DRD1 (Dopamine Receptor D1) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma harzianum

曲霉D2R/DRD2 (Dopamine Receptor D2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus sp.

美澳型核果褐腐病菌DβH (Dopamine-β-Hydroxylase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

污黑腐皮殼D3R/DRD3 (Dopamine Receptor D3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

綠色素鏈霉菌D4R/DRD4 (Dopamine Receptor D4) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces iakyrus

微小桿菌D5R/DRD5 (Dopamine Receptor D5) ELISA Kit 拉丁屬名: Microvirga sp.

靈芝DDC (Dopamine Decarboxylase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

水溶性非食用色素快速篩查盒DAT (Dopamine Transporter) ELISA Kit規(guī)格: 50份樣品試劑用量/盒

蟬擬青霉DT (Dopachrome Tautomerase) ELISA Kit用途: 入藥或生物防治

高地芽孢桿菌VS (Versican/PG-M) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus altitudinis

平菇PHSA (Poly Serium Antigen) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

蠟樣芽孢桿菌PIGR/SC (Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
寄生曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商cath-L/CL peptide  組織蛋白酶L抗原4'-羥基漢黃芩素4H-1-Benzopyran-4-one,5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-8-methoxy-對照藥材 分 子 式: C16H12O6 分 子 量:

CBFA1/RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2)  成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子(多肽)辣椒堿(天然)Capsaicin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C18H27NO3 分 子 量: 305.42

CBP(CREB-binding protein)  CREB結(jié)合蛋白抗原地膚子皂苷IImomordin II化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式:  分 子 量:

CBX3/HP1 gamma  染色盒同源物3抗原多聚賴氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CBX5(Chromobox Homolog 5)  CBX5(多肽)堿性磷酸酶緩沖液(pH9.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CC16(Clara cell protein 16) peptide  克拉拉細(xì)胞蛋白(Clara細(xì)胞分泌蛋白)抗原茜草喬木醇 BA'-Neo-26,28-dinorgammacer-9(11)-ene-3,7,19-triol,13,17-dimethyl-, (3b,7b,19a,21b)-對照藥材 分 子 式: C30H50O3 分 子 量:

CCR-2/5(CC chemokine receptor 2/5)  CC趨化因子受體2/5抗原α-胡蘿卜素Carotene化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C40H56 分 子 量: 536.87264

 


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