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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3294
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-10
- 更新日期: 2025-02-11
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3294 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Babesia equi | LZR3294 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
傘枝犁頭霉MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Lichtheimia corymbifera
灰褐鏈霉菌MMP-17 (Matrix Metalloproteinase 17) ELISA Kit 用途: 分類
枯草芽孢桿菌MMP-24 (Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
線團擬諾卡氏菌MMP-7 (Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Nocardiopsis synnemataformans
成晶節(jié)桿菌MMP-8 (Matrix Metalloproteinase 8) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter crystallopoietes
Phoma medicaginis var. medicaginisMMP-9 (Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
腐皮鐮孢馬特變種ELA2B (Elastase 2B) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium solani var. martii
熱球狀尿素芽孢桿菌TIMP-2 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Ureibacillus thermosphaericus
化妝品檢測用金黃色葡萄球菌TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus aureus for Cosmetics Analysis
熱吸水鏈霉菌TIMP-4 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 4) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces thermohygroscopicus
釀酒酵母LGALS3BP (Lectin Galactoside Binding, Soluble 3 Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
豬絲菌MAT (Matrilysin) ELISA Kit拉丁屬名: rhuriopathiae
橄欖灰鏈霉菌TNNI2 (Troponin I Type 2, Fast Skeletal) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces olivaceogriseus
鏈霉菌TP/TXA2R (Thromboxane Receptor) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有殺蟲及活性。
副豬嗜血桿菌SDF-2 (Stromal Cell Derived Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Haemophilus
馬巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格CLCA4(Calcium-activated chloride channel 4) 鈣激活氯離子通道4抗原乙酰黃芪皂苷IAcetytastragaloside中藥標準品 分 子 式: C47H74O17 分 子 量:
C-Mer/MERTK (proto-oncogene tyrosine kinase) c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗原醋酸銀顯影液標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
c-Myc tag c-Myc tag標簽多肽新異甘草苷neoisoliquiritin化學標準品 分 子 式: 分 子 量:
AU5 tag AU5 tag標簽抗原哈帕卜寧堿Hapepunine中藥標準品 分 子 式: C28H47NO2 分 子 量: 429.678
AU1 tag peptide AU1 tag標簽多肽赤麻木脂素Boehmenan對照藥材 分 子 式: C40H40O12 分 子 量: 712.7384
Glu-Glu Tag peptide Glu-Glu Tag多肽蛋白商陸皂苷甲Esculentoside A中藥標準品 分 子 式: C42H66O16 分 子 量: 826.963840000001
CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗原甲酰胺加樣緩沖液(2×)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: