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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3270
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-10
- 更新日期: 2025-02-11
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3270 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
溶血隱秘桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Arcanobacterium haemolyticum | LZR3270 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
淡紫擬青霉GAL2 (Galectin 2 ) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
麥芽糖假絲酵母EPHA3 (Ephrin Type A Receptor 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida maltosa
莖點(diǎn)霉屬GAL4 (Galectin 4) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
香菇GAL8 (Galectin 8) ELISA Kit 拉丁屬名: Lentinula edodes
蘇云金芽孢桿菌殺蟲亞種GAL7 (Galectin 7) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母GAL9 (Galectin 9 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
豌豆根瘤菌Gal-6S (Galactose-6-Sulphatase) ELISA Kit用途: 與苕子共生固氮
假黃色單胞菌UBC (Urinary Bladder Cancer Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudoxanthomonas sp.
毛木耳PLA2R1 (Phospholipase A2 Receptor 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
堆形艾美耳球蟲PLB (Phospholipase B) ELISA Kit拉丁屬名: acervulina
乳酸片球菌cPLA2 (Cytosolic Phospholipase A2) ELISA Kit用途: 降纖維
分枝節(jié)桿菌NP (Nandrolone Phenylpropionate) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter ramosus
短裙竹蓀3-3EFNA3 (Ephrin A3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
紡錘形擬酵母PLD2 (Phospholipase D2) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudozyma fusiformata
蒂莫內(nèi)馬賽菌PYD (Pyridinoline) ELISA Kit拉丁屬名: Massilia timonae
溶血隱秘桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格PSD-95 突觸后密度蛋白95(抗原)去甲檳榔次堿Guvacine hydrochloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H9NO2 分 子 量: 127.14116
BRCA2(Breast cancer susceptbility gene 2) 易感基因2抗原諾氟沙星norfloxacin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H18FN3O3 分 子 量: 319.33
PTP-1B (Protein-tyrosine phosphatase, non-receptor ) 蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(抗原)二氫大豆苷Dihydrodaidzin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 維甲酸受體-α 多肽二氫香豆素Chroman-2-one中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C9H8O2 分 子 量: 148.15862
glycoprotein (E1 glycoprotein) [Rubella virus] 病毒糖蛋白多肽片段14-去氧-11,12-二去氫穿心蓮內(nèi)酯2(5H)-Furanone, 3-[(1E)-2-[(1R,4aS,5R,6R,8aR)-decahydro-6-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-5,8a-dimethyl-2-methylene-1-naphthalenyl]ethenyl]-對照藥材 分 子 式: C20H30O4 分 子 量: 334.4498
SAP-1 (Synapse associated protein-I) peptide 突觸相關(guān)蛋白-1(多肽抗原)白屈菜堿chelidonine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H19NO5 分 子 量: 353.37
SARS S-protein(抗原) 絞股藍(lán)皂苷中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量: