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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3330
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-02-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3330 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Blastomyces dermatitidis | LZR3330 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
釀酒酵母CK-19/KRT19 (Cytokeratin 19) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
單色下皮黑孔菌CK-20/KRT20 (Cytokeratin 20) ELISA Kit拉丁屬名: Cerrena unicolor
大腸埃希氏桿菌CYFRA21-1 (Cytokeratin Fragment Antigen 21-1) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
類芽孢桿菌屬CVL/EZR (Cytovillin/Ezrin) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus contaminans
迪氏野野村氏菌CYB561 (Cytochrome b-561) ELISA Kit 拉丁屬名: Nonomuraea dietziae
枯草芽孢桿菌CYP7A1 (Cytochrome P450 7A1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
構(gòu)巢曲霉CYP21B (Cytochrome P450 21B) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus nidulans
惡臭假單胞菌ECM1 (Extracellular Matrix Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas putida
Bacillus tequilensisMEPE (Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
環(huán)狀芽胞桿菌ERK (Extracellular Signal Regulated Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus circulans
球孢鏈霉菌ERK1 (Extracellular Signal Regulated Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces globisporus(Krassilnikov) Waksman
禽腺病毒Ⅷ型ERK2 (Extracellular Signal Regulated Kinase 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
粉紅聚端孢霉ERK3 (Extracellular Signal Regulated Kinase 3) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
產(chǎn)黃青霉SOCS3 (Suppressors of Cytokine Signaling 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
新城疫病毒CYTH1 (Cytohesin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Newcastle disease virus
芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格IL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受體抗原重樓皂苷VIPolyphyllin VI中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C40H64O12 分 子 量: 736.92896
IL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha ) 白介素1α抗原檀香醇2-Methyl-5-((1S,2S,4R)-2-methyl-3-methylenebicyclo[2.2.1]heptan-2-yl)pent-2-en-1-ol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H24O 分 子 量: 220.35046
IL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原（大、小鼠）蘆薈新甙D4H-1-Benzopyran-4-one,8-[2-O-[(2E)-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxo-2-propen-1-yl]-b-D-glucopyranosyl]-2-[(2R)-2-hydroxypropyl]-7-methoxy-5-methyl-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H32O11 分 子 量:
IL-2 (Interleukin-2)Human IL-2抗原（人）絞股藍(lán)皂苷XLIXGypenoside XLIX中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C52H86O21 分 子 量: 1,047.23
IL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原鬧達(dá)柯裂亭7H-Furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one,2,3-dihydro-2-(1-hydroxy-1-methylethyl)-, (2R)-對(duì)照藥材 分 子 式: C14H14O4 分 子 量: 246.25856
IL-4(Interleukin-4) 白介素4抗原山梗菜堿Lobeline中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H27NO2 分 子 量: 337.45528
IL-4(Interleukin-4)human peptide 白介素4抗原磷酸奧司他韋Oseltamivir phosphate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H28N2O4.H3Po4 分 子 量: 410.4
