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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3332
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-02-10
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3332 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
殺蠣包拉米蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Bonamia exitiosus | LZR3332 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
空腸彎曲桿菌tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit拉丁屬名: jejuni
生活飲用水 鈣、鎂 TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit 拉丁屬名: 生活飲用水 鈣、鎂
食物鹽單胞菌FBL (Fibrillarin) ELISA Kit 拉丁屬名: Halomonas alimentaria
相思根瘤菌GHR (Growth Hormone Receptor) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母FGα (Fibrinogen Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces Cerevisiae
產(chǎn)黃青霉FGβ (Fibrinogen Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
細(xì)極鏈格孢(可訂購(gòu))FGL2 (Fibrinogen Like Protein 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
產(chǎn)二素鏈霉菌FRA (Fibronection Related Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces ambofaciens
托木爾假單胞菌FSP (Fibroblast Surface Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas tuomuerensis
枯草芽胞桿菌SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
泛菌屬CKMT1A (Creatine Kinase, Mitochondrial 1A ) ELISA Kit 拉丁屬名: Pantoea sp.
鷲峰假絲酵母CKMT1B (Creatine Kinase, Mitochondrial 1B ) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida jiufengensis
派倫霉屬KRT10 (Keratin, Type I Cytoskeletal 10) ELISA Kit拉丁屬名: Peyronellaea sp.
天藍(lán)色鏈霉菌SNRPD1 (Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide D1) ELISA Kit 用途: 代謝產(chǎn)物具有活性。
產(chǎn)朊假絲酵母SNRPC (Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide C) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida utilis
殺蠣包拉米蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商Inhibin Alpha 抑制素α抗原去氧穿心蓮內(nèi)酯Deoxyandrographolide中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H30O4 分 子 量: 334.4498
Inhibin beta A peptide 抑制素beta A抗原矮陀陀胺堿 APregn-5-en-20-amine,3-methoxy-N,N-dimethyl-, (3b,20S)- (9CI)對(duì)照藥材 分 子 式: C24H41NO 分 子 量:
Inhibin beta B 抑制素βB抗原雷帕霉素rapamycin from streptomyces*hygroscopicus中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C51H79NO13 分 子 量: 914.18
Integrin Alpha3 整合素α3抗原丹參酮ITanshinone I中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H12O3 分 子 量: 276.29
Integrin Beta5 整合素β5抗原橙花醇(Z)-3,7-Dimethylocta-2,6-dien-1-ol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H18O 分 子 量: 154.24932
Integrin alpha 1 整合素α1抗原內(nèi)源性生物素封閉液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Integrin Alpha4 Beta7/LPAM-1 (Lymphocyte Peyer’s patch Adhesion Molecule 1/Integrin alpha4,beta7) 整合素α4β7抗原牛蒡子苷元-4'-O-β-龍膽二糖苷Arctigenin-4'-beta-gentiobiosid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C33H44O16 分 子 量: 696.693