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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3334
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-02-10
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3334 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
包納米蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Bonamia spp. | LZR3334 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
清酒乳桿菌清酒亞種SOX18 (Sex Determining Region Y Box Protein 18) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus sakei subsp. sakei
鏈格孢屬SOX2 (Sex Determining Region Y Box Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Alternaria sp.
糞生糞殼SOX3 (Sex Determining Region Y Box Protein 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
球毛殼菌SHBG (Sex Hormone Binding Globulin) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium globosum Kunze
深褐芽孢桿菌TS/TYMS (Thymidylate Synthetase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus atrophaeus
多主葡萄殼菌TLA (Thymus Leukemia Antigen) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
Bacteroides sartorii TECK/CCL25 (Thymus Expressed Chemokine) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacteroides sartorii
假單胞菌TI-Ag (Thymus Independent Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas marginalis
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS5TP (Thymidine Phosphorylase) ELISA Kit規(guī)格: Z123
假單胞菌屬TMSβ10 (Thymosin Beta 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas pelagia
枯草芽孢桿菌TMSB4 (Thymosin Beta 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
蠟樣芽孢桿菌TP5 (Thymopentin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
出芽短梗霉*TD-Ag (Thymus Dependent Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Aureobasidium pullulans (de Bary) Arnaud
鏈霉菌OLFM4 (Olfactomedin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces sp.
擬粉紅鎖擲孢酵母NPTX2 (Neuronal Pentraxin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Sporidiobolus pararoseus
包納米蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29) 粘附分子整合素β1抗原羅漢果皂苷IIIea-D-Glucopyranoside,(3a,9a,10R,11R,24R)-3- (a-D-glucopyranosyloxy)-11,25-dihydroxy-9- methyl-19-norlanost-5-en-24-yl 2-O-a-D-glucopyranosyl- 中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C48H82O19 分 子 量: 963.15328
Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e) 粘附分子整合素α5抗原甘氨酸緩沖液(0.05mol/L,pH8.6-10.6)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Integrin alpha V/CD51 peptide 整合素αV抗原Ent-14,16-環(huán)氧基-8-海松烯-3,15-二醇Phenanthro[1,2-b]furan-1,7-diol,1,2,3a,4,5,*,6,7,8,9,9a,10,11,11a-tetradecahydro-6,6,9a,11a-tetramethyl-,(1R,3aR,*S,7R,9aR,11aR)-對照藥材 分 子 式: C20H32O3 分 子 量:
JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1) 蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗原Crovatin9aH,10aH-2,3a,6a-[1]Propanyl[3]ylidene-4H-difuro[2,3-b:3',2'-g]oxocin-3-carboxylicacid, 8-(3-furanyl)hexahydro-6-methyl-, methyl ester,(2R,3R,3aS,6R,6aR,8S,9aR,10aS,11R)-rel-(-)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H26O6 分 子 量:
JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2) 蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-2抗原雞屎藤苷Paederoside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H22O11S 分 子 量: 446.43
phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗原冬凌草甲素Oridonin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H28O6 分 子 量: 364.43
JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3) c-Jun氨基末端激酶1/3多肽抗原?;悄懰徕c2-([3-ALPHA,7-ALPHA,12-ALPHA-TRIHYDROXY-24-OXO-5-BETA-CHOLAN-24-YL]AMINO)ETHANESULFONIC ACID中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C26H44NO7S-.Na+ 分 子 量: 537.68486