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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3369
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-02-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3369 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
綿羊布魯氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Brucella ovis | LZR3369 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
凍干補(bǔ)體BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit規(guī)格: 1ml/200頭份
美澳型核果褐腐病菌BMP8B (Bone Morphogenetic Protein 8B) ELISA Kit 拉丁屬名: Monilinia fructicola
PaenibacillusBMPR1A (Bone Morphogenetic Protein Receptor 1A) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus sp.
大腸埃希菌BMPR2 (Bone Morphogenetic Protein Receptor II) ELISA Kit拉丁屬名: coli
大腸埃希菌BALP (Bone Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: coli
大腸埃希菌CASP1 (Caspase 1) ELISA Kit拉丁屬名: coli
黃硬皮馬勃BK (Bradykinin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
柱孢綠僵菌BDNF (Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Metarhizium
美麗胡枝子根瘤菌BNP (Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium sp.
棉阿舒囊霉BRAK (Breast And Kidney Expressed Chemokine) ELISA Kit 用途: 產(chǎn)核黃素
綠色木霉CA724 (Tumor Marker CA724) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma viride
大腸埃希菌Ca-ATPase (Calcium ATPase) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
釀酒酵母VE-Cadherin (Vascular Endothelial Cadherin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
弓形蟲(GTS－2株)E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit拉丁屬名: gondii
灰樹花-4NCAD (Neural Cadherin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
綿羊布魯氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 STAT5(signal transducers and activators of transduction5) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗原鳳仙萜四醇苷Fb-D-Glucopyranoside,(1R,2S,4aR,4bR,6'R,6aR,7R,8S,10aR,10bR,12aS)-6'-[(1R)-2-(b-D-glucopyranosyloxy)-1-methylethyl]octadecahydro-1-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-4a,4b,7,10a-tetramethylspiro[chrysene-2(1H),3'(4'H)-[2H]pyran]-8-yl2-O-b-D-xylopyranosyl- (9CI)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C47H80O19 分 子 量:
STAT6(signal transducers and activators of transduction 6) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗原紫草氰苷Acetonitrile,2-[(4R,5S,6S)-6-(b-D-glucopyranosyloxy)-4,5-dihydroxy-2-cyclohexen-1-ylidene]-,(2Z)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C14H19NO8 分 子 量: 329.30256
SUMO 類泛素蛋白R(shí)TA-402Oleana-1,9(11)-dien-28-oicacid, 2-cyano-3,12-dioxo-, methyl ester化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H43NO4 分 子 量: 505.68812
Gamma-Synuclein/SNCG 核突觸蛋白-γ抗原2-O-乙酰山椒子烯酮中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
phospho-Tau protein (pThr489) peptide 磷酸化微管相關(guān)蛋白多肽24-乙酰澤瀉醇FAlisol F 24-acetate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
MAP-2(microtubule associated protein 2) 微管相關(guān)蛋白2抗原黃柏呈Lanost-7-en-3-one,23,24-dihydroxy-25-methoxy-, (13a,14b,17a,20S,23R,24S)-對(duì)照藥材 分 子 式: C31H52O4 分 子 量:
MAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A) 微管相關(guān)蛋白1A抗原氯化鈣溶液(1mol/L,無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
