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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3372
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-02-10
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3372 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
水牛正痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Buffalo Pox Virus(BPXV) | LZR3372 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
*蜜環(huán)菌CASP14 (Caspase 14) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
波茨坦芽孢桿菌CAD (Caspase Activated Dnase) ELISA Kit 拉丁屬名: Brevibacillus borsensis
新城疫病毒CTNNa1 (Catenin, Alpha 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Newcastle disease virus
藤黃檀根瘤菌CTNNb1 (Catenin, Beta 1) ELISA Kit 用途: 固氮
大腸埃希氏桿菌CTSD (Cathepsin D) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
黑靈芝CTSK (Cathepsin K) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母CTSL (Cathepsin L) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
鏈霉菌CDX2 (Caudal Type Homeobox Transcription Factor 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
短密青霉CAV1 (Caveolin 1) ELISA kit拉丁屬名: Penicillium brevicompactum
巨大芽胞桿菌CEBPD (CCAAT/Enhancer Binding Protein Delta) ELISA Kit 用途: 分類、研究,具有處理富營養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力。
木層孔菌CDC24 (Cell Division Cycle 24) ELISA Kit 拉丁屬名: Phellinus sp.
泡囊短波單胞菌CENPA (Centromere Protein A) ELISA Kit 拉丁屬名: Brevundimonas vesicularis
*蜜環(huán)菌CENPB (Centromere Protein B) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
節(jié)桿菌CENPE (Centromere Protein E) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter sp.
長孢鏈霉菌CENPH (Centromere Protein H) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces longisporus
水牛正痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商TLR4/CD284 (Toll-like receptor 4) Toll樣受體4抗原異粉防己堿N-2'-氧化物Berbaman, 6,6',7,12-tetramethoxy-2,2'-dimethyl-, 2'-oxide化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C38H42N2O7 分 子 量: 638.74928
TLR5/CD285 (Toll-like receptor 5) Toll樣受體5抗原(±)-松屬素Pinocembrin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H16O5 分 子 量: 360.35944
TM(Thrombomodulin) 調(diào)節(jié)蛋白多肽異牡荊素Isovitexin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H20O10 分 子 量: 432.38
Tn-C(Tenascin-C)C-Terminus 腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原甘草次酸十八酯Octadecyl 3-hydroxy-11-oxoolean-12-en-29-oate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C48H82O4 分 子 量: 723.16
TNF-alpha -α抗原乙酰丁香酮1-(4-Hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)ethanone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H12O4 分 子 量: 196.19988
TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) -β抗原新原莪述烯醇6(1H)-Azulenone,2,3,5,7,8,8a-hexahydro-1-hydroxy-1,4-dimethyl-7-(1-methylethylidene)-,(1S,8aS)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H22O2 分 子 量: 234.33398
TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) α誘導(dǎo)蛋白1抗原安格洛甙CAngoroside C中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H48O19 分 子 量: 784.75