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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數據分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

孢囊桿菌C4a (Complement Component  4a) ELISA Kit拉丁屬名: Cystobacter SP.

腸膜明串珠菌C* (Complement Component  *) ELISA Kit拉丁屬名: Leuconostoc  mesenteroides

深海芽孢桿菌CTGF (Connective Tissue Growth Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Thalassobacillus  sp.

果生鏈核盤菌CX26 (Connexin 26) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

抗生鏈霉菌CX31 (Connexin 31) ELISA Kit  拉丁屬名: Streptomyces antibioticus

谷氨酸棒桿菌CX37 (Connexin 37) ELISA Kit  拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

節(jié)桿菌屬CX40 (Connexin 40) ELISA Kit  拉丁屬名: Arthrobacter     pascens

黑根須腹菌CX43 (Connexin 43) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

平菇CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit  用途: 食用、藥用

螺卷毛殼CNTN2 (Contactin 2) ELISA Kit  拉丁屬名: Chaetomium cochliodes

鮮綠青霉CNTN3 (Contactin 3) ELISA Kit  拉丁屬名: Penicillium viridicatum

釀酒酵母CORT (Corticosterone) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

米曲霉SIRT1 (NAD-dependent protein deacetylase sirtuin-1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

釀酒酵母CRH (Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

日勾維腸桿菌C-P (C-Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter gergoviae
伯克氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格VEGFR2  內皮生長因子受體2Tesetaxel2-Pyridinepropanoic acid, b-[[(1,1-dimethylethoxy)carbonyl]amino]-3-fluoro-a-hydroxy-,(2aS,2bR,3S,4S,6S,8aR,10S,11aS,11bR,13aR)-2a-(acetyloxy)-3-(benzoyloxy)-10-[(dimethylamino)methyl]-2a,2b,3,4,5,6,8a,11a,11b,12,13,13a-dodecahydro-4-hydroxy-7,11b,14,14-tetramethyl-4,8-methano-2H-oxeto[3'',2'':3',4']benzo[1',2':3,4]cyclodeca[1,2-d][1,3]dioxol-6-ylester, (aR,bS)-化學標準品 分 子 式: C46H60N3O13F 分 子 量: 881.979300000001

sVEGFR2  可溶性內皮生長因子受體2肉豆蔻木脂素Myrislignan中藥標準品  分 子 式: C29H22N5O4F 分 子 量: 523.51448

VEGFR-3/FLt-4  內皮細胞生長因子受體-3（多肽）Hederacolchiside EOlean-12-en-28-oicacid, 3-[(O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1®4)]-a-L-arabinopyranosyl)oxy]-, O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®4)-O-b-D-glucopyranosyl-(1®6)-b-D-glucopyranosyl ester, (3b)-中藥標準品  分 子 式: C65H106O30 分 子 量:

VEGFR-3(Vascular Epidemal growth factor receptor-3)  內皮細胞生長因子受體-3抗原3-咖啡?？崴峒柞?-caffeoylquinic acid methyl ester化學標準品 分 子 式: C17H20O9 分 子 量: 368.335

VWF (Von Willebrand Factor)  假性因子/性因子抗原雷公藤三萜酸 AAbrusgenic-acid對照藥材 分 子 式: C30H48O4 分 子 量:

Wnt1  信號通路Wnt1抗原磷酸川芎嗪Lilopristone中藥標準品  分 子 式: C29H37NO3 分 子 量: 447.60898

WWOX (WW domain-containing oxidoreductase)  包含氧化還原酶的WW域抗原5-羥基馬鞭草苷Hastatoside中藥標準品  分 子 式: C17H24O11 分 子 量: 404.366