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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3355
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-02-10
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3355 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
牛病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Bovine Leukemia Virus(BLV) | LZR3355 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
氧化節(jié)桿菌IL-11 (Interleukin 11) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter oxydans
猴頭sdLDL (Small Dense Low Density Lipoprotein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
馬克斯克魯維酵母hs-CRP (high-sensitivity C-reactive protein) ELISA Kit拉丁屬名: Kluyveromyces marxianus
出芽短梗霉TSHR (Thyroid Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Aureobasidium pullulans
聚生殼菌Lactoferrin (LTF) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
球孢白僵菌TERF2IP (Telomeric Repeat Binding Factor 2 Interacting Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Beauveria bassiana
釀酒酵母FNDC5 (Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5 ) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
根瘤菌Anti-dsDNA (Anti-Double Stranded DNA Antibody) ELISA Kit用途: 固氮
松口蘑DBT (Dihydrolipoamide branched chain transacylase E2) ELISA kit拉丁屬名: Tricholoma matsutake
斑玉蕈AD (Adropin) ELISA kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
醬油曲霉Salusin β (Salusin Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus sojae
釀酒酵母ENG (Soluble Endoglin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
蝦苗殺蝦微桿菌c-MET/HGFR (hepatocyte growth factor receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Microbacterium shrimpcida
果生鏈核盤菌RECK (Reversion-inducing-cysteine-rich protein with kazal motifs) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
根瘤菌CD44v5 (cluster of differentiation 44 variant 5)ELISA Kit用途: 固氮
牛病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書PCX/PODXL(Podocalyxin) 足細(xì)胞特異蛋白抗原1-氧-乙酰旋覆花內(nèi)酯1-O-acetyl Britannilactone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H24O5 分 子 量: 308.36946
PDGF-BB peptide 血小板源性生長因子-BB抗原人參皂苷F2Ginsenoside F2中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C42H72O13 分 子 量: 785.01328
Pdx1(pancreatic and duodenal homeobox 1) 胰十二指腸同源異型盒基因抗原紫杉脂素( )-Taxiresinol; Taxiresinol化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H22O6 分 子 量: 346.37438
pectinesterase inhibitor 18 peptide 果膠酶抗原6-姜烯酚6-Shogaol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H24O3 分 子 量: 276.37
PEG10(Paternally expressed gene 10) 高表達基因抗原黃苷-5'-單磷酸鈉5'-Xanthylic acid,disodium salt (8CI,9CI)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H11N4Na2O9P 分 子 量:
PENK/Enkephalin A(Preproencephalin A) 腦啡肽靈芝烯酸DGanoderenic acid D中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H40O7 分 子 量: 512.6344
PEPT2 (Peptide-transporters 2) 腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白2/小肽轉(zhuǎn)運蛋白2抗原L-賴氨酸鹽酸鹽L-Lysine hydrochloride化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H14N2O2.HCl 分 子 量: 182.6485
