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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3387
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-02-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3387 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
幽門(mén)彎曲桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Campylobacter pybridis | LZR3387 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
鐮孢霉FRS2 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
漏斗狀側(cè)耳（鳳尾菇）FRS3 (Fibroblast Growth Factor Receptor SubstRate 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Pleurotus sajor-caju
貝爾氏菌屬FMOD (Fibromodulin) ELISA Kit 拉丁屬名: Belliella sp.
類黃假單胞菌FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas synxantha
葡萄座腔菌FN (Fibronectin) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
粗糙脈孢菌FLNa (Filamin A) ELISA Kit 拉丁屬名: Neurospora crassa
喜堿運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌Flt3 (FMS-like Tyrosine Kinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter alkaliphilus
蠟樣狀芽孢桿菌FAK (Focal Adhesion Kinase) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus cereus
豬放線桿菌FSH (follicle-stimulating hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Actinobacillus suis
膜醭畢赤酵母FST (Follistatin) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia membranifaciens
蘇云金芽胞桿菌FOXP3 (Forkhead Box Protein P3) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
羊肚伴生菌FPR2 (Formyl Peptide Receptor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
黃棕色鏈霉菌FK (Fractalkine) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces flavofuscus
德?tīng)柌加墟呓湍?/span>GAD-Ab-IgM (Glutamic Acid Decarboxylase Autoantibody IgM)ELISA Kit拉丁屬名: Torulaspora delbrueckii
乳桿菌F-TESTO (Free Testoterone) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
幽門(mén)彎曲桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)Deltex-1 (DTX1) (Deltex protein 1)抗原梓苷，梓實(shí)糖苷b-D-Glucopyranoside,(1aS,1bS,2S,*R,6S,6aS)-1a,1b,2,*,6,6a-hexahydro-6-[(4-hydroxybenzoyl)oxy]-1a-(hydroxymethyl)oxireno[4,5]cyclopenta[1,2-c]pyran-2-yl對(duì)照藥材 分 子 式: C22H26O12 分 子 量: 482.43464
DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT) DISC1 N端抗原雷公藤內(nèi)酯甲Wilforlide A中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H46O3 分 子 量: 454.68
DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原似梨木雙黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷Ochnaflavone7-O-β-D-gluco-pyranoside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H18O10 分 子 量: 538.45792
DR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受體（抗原）硫酸魚(yú)精蛋白溶液(10%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16) 人病毒16型E7蛋白抗原知母皂苷CTimorsaponin C中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
EGF-R (Epidemal growth factor receptor) 表皮生長(zhǎng)因子受體（抗原）糖精Benzo[d]isothiazol-3(2H)-one 1,1-dioxide化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C7H5NO3S 分 子 量: 183.1845
Eukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬氨酸蛋白酶家族蛋白(水稻蛋白的一種)（抗原）鹽酸吐根酚堿Cephaeline hydrochloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C28H40Cl2N2O4 分 子 量: 539.53
