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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3409
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3409 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
毛細(xì)線蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | Capillaria spp. | LZR3409 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
潔小菇CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit用途: 資源真菌
楊奇青霉pIκBα (Phospho-Inhibitory Subunit of NF Kappa B Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium janczewskii
青色鏈霉菌OLAb (Oxidized Lowdensity Lipoprotein Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces glaucus
短芽孢桿菌MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus
蒼黃鏈霉菌PP (Pancreatic Polypeptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces luridus
橄欖鏈霉菌PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces olivaceus
E.coli DH5α λpirPTHR2 (Parathyroid Hormone Receptor 2) ELISA Kit 規(guī)格: 冰袋泡沫盒快遞
細(xì)黃鏈霉菌PTHrP (Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces microflavus
*茄鏈格孢Pax (Paxillin) ELISA Kit 用途: 植物病原菌
平菇1PDAP1 (PDGFA Associated Protein 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鐮毛霉PTD (Pentosidine) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor falcatus
炭疽芽孢桿菌PP (Pepsin) ELISA Kit拉丁屬名: anthracis
擬熱帶假絲酵母PGA (Pepsinogen A) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida pseudotropicalis (Carlanii) Basgal
馬克斯克魯維酵母PGC (Pepsinogen C) ELISA Kit 拉丁屬名: Kluyveromyces marxianus
釀酒酵母PIN4 (Peptidyl Prolyl Cis/Trans Isomerase NIMA Interacting 4 Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
毛細(xì)線蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒 PSCA 干細(xì)胞抗原DNA凝膠加樣緩沖液(10×DNA Loading Buffer)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ADH/AVP peptide 抗激素/升壓素抗原（和肽素）2,5,14-三乙酰氧基-3-苯甲酰基氧基-8,15-二羥基-7-異丁酰氧基-9-煙酰氧基氧基-6(17),11E-麻風(fēng)樹屬二烯2,5,14-Triacetoxy-3-benzoyloxy-8,15-dihydroxy-7-isobutyroyloxy-9-nicotinoyloxyjatropha-6(17),11E-diene對照藥材 分 子 式: 分 子 量:
PRRSV M protein 豬藍(lán)耳病病毒M蛋白L-纈氨酸L-Valine化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C5H11NO2 分 子 量: 117.14634
Newcastle disease virus/HRP 雞新城疫疫苗（雞瘟4型混合病毒）偶聯(lián)辣根過氧化物酶白當(dāng)歸素Byak-angelicin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H18O7 分 子 量: 334.31
sIgA 大鼠分泌型IgA(抗原)苜蓿素5,7-Dihydroxy-2-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-5,6-dihydro-4H-chromen-4-one對照藥材 分 子 式: C17H16O7 分 子 量: 332.30474
Melamine/KLH 三聚氰胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物反式-異扁柏脂素Phenol,4,4'-[(1E,3S)-3-ethenyl-1-propene-1,3-diyl]bis-對照藥材 分 子 式: C17H16O2 分 子 量: 252.30774
Melamine/BSA 三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物醋酸氯己定CHLOROHEXIDINE ACETATE化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C7H6O3 分 子 量: 625.55
