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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3398
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3398 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
犬腺體病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Canine Adenovirus Type 2（CAV-2） | LZR3398 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
釀酒酵母HAase (Hyaluronidase) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
糙皮側(cè)耳HIF-1α (Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus ostreatus
佐久氏沙雷氏菌ID(deiodinase) ELISA Kit拉丁屬名: Serratia marcescens
總狀毛霉IgG-Fc ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor racemosus Fresenius
釀酒酵母IgA (Immunoglobulin A) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
稻黑孢霉IgE (Immunoglobulin E) ELISA Kit拉丁屬名: Nigrospora oryzae
缺陷短波單胞菌IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas diminuta
無IgG1 (Immunoglobulin G1) ELISA Kit拉丁屬名: Starmerella bombicola
靈芝(紅芝，赤芝)（可訂購）IgG2a (Immunoglobulin G2a) ELISA Kit拉丁屬名: Ganoderma Lucidum (Leysser : Fries) Karsten
孟氏假單胞菌IgM (Immunoglobulin M) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
刺孢吸水鏈霉菌NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit用途: 產(chǎn)正放線酮，可防治多種植物真菌病害
白井盤多毛孢INHA (Inhibin A) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
凝結(jié)芽胞桿菌INHB (Inhibin B) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus coagulans
金產(chǎn)色鏈霉菌INHbA (Inhibin Beta A) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces aureochromogenes
蟲草屬INHBP (Inhibin Binding Protein) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
犬腺體病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格MSH2 (mutS homolog 2) MSH2抗原3,4-二羥基苯乙酸3,4-dihydroxyphenylacetic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C8H8O4 分 子 量: 168.14672
NKR(Neuromedin B Receptor) 神經(jīng)激肽B受體（抗原）刺槐雙氫黃酮4H-1-Benzopyran-4-one,2,3-dihydro-7-hydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-, (2S)-對照藥材 分 子 式: C15H12O6 分 子 量: 288.25218
NF-L(Neurofilament triplet L) 低分子量神經(jīng)絲蛋白（抗原）鄰苯二甲酸二異丙酯1,2-Benzenedicarboxylicacid, 1,2-bis(1-methylethyl) ester 高端化學(xué)試劑 分 子 式: C14H18O4 分 子 量: 250.29032
NF-M (Neurofilament triplet M) 中分子量神經(jīng)絲蛋白（抗原）P:C(1:1,pH﹤5.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
NF-H(Neurofilament triplet H) 高分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原)檸檬烯dipentene其它化學(xué)試劑 分 子 式: C10H16 分 子 量: 136.23
NIS(Na+/I-symporter;NIS) 鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白（多肽抗原）雪松素Cedrin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H18O6 分 子 量: 294.29982
NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細(xì)胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)5-羥色胺鹽酸鹽3-(2-Aminoethyl)-1H-indol-5-ol hydrochloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H12N2O.HCl 分 子 量: 212.67602
