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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3416
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3416 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
麥芽香肉桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Carnobacterium maltaromaticum | LZR3416 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
貪噬菌屬PTPRN (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type N) ELISA Kit 拉丁屬名: Variovorax ginsengisoli
賴氨酸芽孢桿菌PTPRO (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type O) ELISA Kit 拉丁屬名: Lysinibacillus mangiferihumi
奇異球菌PCDH1 (Protocadherin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Deinococcus sp.
膠紅酵母PARC (Pulmonary Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodotorula mucilaginosa
大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○154SPA (Pulmonary Surfactant Associated Protein A) ELISA Kit 規(guī)格: 1ml
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種SPD (Pulmonary Surfactant Associated Protein D) ELISA Kit 拉丁屬名: equi subsp.zooepidemicus
冷海水黃桿菌PDHa (Pyruvate Dehydrogenase Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium frigidimaris
暗產(chǎn)色鏈霉菌*PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces phaeochromogenes
亮白曲霉PDP (Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus candidus
枇杷葉點(diǎn)霉PDH E1 (Pyruvate Dehydrogenase-E1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
膠柱頭孢霉屬PK (Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
Paenibacillus taichungensisM2-PK (Pyruvate Kinase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
植物乳桿菌PK (Pyruvate Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
大腸埃希氏菌Qa-2 (Qa Lymphocyte Antigen 2 Region) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
深藍(lán)紫色桿菌RAPGEF2 (Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Janthinobacterium lividum
麥芽香肉桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商CD71/TFR/Transferrin receptor 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體L-羥脯氨酸(2S,4R)-4-Hydroxypyrrolidine-2-carboxylic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C5H9NO3 分 子 量: 131.12986
GAPDH(3E12)-Loading Control 3-磷酸甘油醛脫氫酶單克隆抗體(內(nèi)參抗體)Hanks平衡鹽粉劑(1×HBSS,含酚紅)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
GAPDH 3-磷酸甘油醛脫氫酶抗體(內(nèi)參抗體)4’-去甲基去氫鬼臼毒素化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
beta-Actin (Loading Control) β-肌動(dòng)蛋白抗體（內(nèi)參抗體）橙皮素7-O-葡萄糖苷4H-1-Benzopyran-4-one,7-(b-D-glucopyranosyloxy)-2,3-dihydro-5-hydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-,(2S)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H24O11 分 子 量: 464.41936
14-3-3(Alpha/Beta/Gamma/Delta/Epsilon) 14-3-3蛋白抗體堪非醇 3-O-阿拉伯糖苷4H-1-Benzopyran-4-one, 3-(α-L-arabinopyranosyloxy)-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-對(duì)照藥材 分 子 式: C20H18O10 分 子 量: 418.35092
phospho-14-3-3 protein zeta/delta(Ser58) 磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗體豬去氧膽酸Hyodeoxycholic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C24H40O4 分 子 量: 392.58
14-3-3 family protein 蘋果14-3-3蛋白抗體(植物)印烏堿化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
