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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

灰樹花TAF4 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 4) ELISA Kit  用途: 用于科研教學。

根瘤菌MAPτ (Microtubule Associated Protein Tau/Tau Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

澳大利亞糖絲菌TXLNa (Taxilin Alpha) ELISA Kit  拉丁屬名: Saccharothrix australiensis

根瘤菌TXLNb (Taxilin Beta) ELISA Kit  用途: 與紫穗槐共生固氮

釀酒酵母TEK (Tyrosine Kinase, Endothelial) ELISA Kit  拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母TE (telomerase) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

維羅納假單胞菌TNC (Tenascin C) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

平臍蠕孢菌TNX (Tenascin X) ELISA Kit 用途: 研究

金黃色葡萄球菌TDG1 (Teratocarcinoma Derived Growth Factor 1) ELISA Kit  拉丁屬名: Staphylococcus  aureus

玻利維亞鹽單胞菌TCC C5b-9 (Terminal Complement Complex C5b-9) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas boliviensis

草生鏈霉菌TIEG1 (TGF-beta-inducible early response gene-1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces pratensis

金頂側(cè)耳、榆黃磨、金頂磨TBP2 (Thioredoxin Binding Protein 2) ELISA Kit  拉丁屬名: Pleurotus citrinopileatus Sing.

葡萄座腔菌TrxR1 (Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

適宜劍菌Trx (Thioredoxin) ELISA Kit 拉丁屬名: Ensifer terangae

雞樅(雞菌）TAFI (Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor) ELISA Kit拉丁屬名: Termitomyces eurhizus
雞胚致死孤兒病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書OST-beta  有機溶質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白OSTβ抗體氯化兩面針堿2,3-Dimethoxy-12-methyl-[1,3]dioxolo[4',5':4,5]benzo[1,2-c]phenanthridin-12-ium chloride中藥標準品  分 子 式: C21H18NO4+.Cl- 分 子 量: 383.82492

AANAT  芳香胺N-乙酰化轉(zhuǎn)移酶抗體拉莫三嗪6-(2,3-Dichlorophenyl)-1,2,4-triazine-3,5-diamine化學標準品 分 子 式: C9H7N5Cl2 分 子 量: 256.09138

AT2R2  緊張素Ⅱ受體2抗體尖葉云香堿，吳茱萸素2,3-Butanediol,1-[(4,8-dimethoxyfuro[2,3-b]quinolin-7-yl)oxy]-3-methyl-, (2R)-對照藥材 分 子 式: C18H21NO6 分 子 量: 347.36244

Influenza A virus (Duck)  鴨病毒抗體牛七堿Aconitane-3,13,14,15-tetrol,8-ethoxy-20-ethyl-1,6,16-trimethoxy-4-(methoxymethyl)-, 3-acetate 14-benzoate,(1a,3a,6a,14a,15a,16b)-化學標準品 分 子 式: C36H51NO11 分 子 量: 673.79024

TNF-alpha  -α抗體(1R)-(-)-桃金娘烯醛(-)-Myrtenal化學標準品 分 子 式: C10H14O 分 子 量: 150.21756

AARS2  丙氨酰tRNA合成酶2抗體1,3,7-三羥基-9H-氧雜蒽-9-酮9H-Xanthen-9-one,1,3,7-trihydroxy-化學標準品 分 子 式: C13H8O5 分 子 量:

TDRD9/HIG1  缺氧誘導(dǎo)蛋白HIG1抗體常春藤皂苷元Hederagenin中藥標準品  分 子 式: C30H48O4 分 子 量: 472.7