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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3441
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-12
- 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3441 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
枝孢霉通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | Cladosporium spp. | LZR3441 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
黃桿菌MYO (Myoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Flavobacterium sp.
小孢根霉原變種Tn-T (Troponin T) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. microsporus
中慢生根瘤菌Tn-I (Troponin I) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
溜曲霉PAPPA (Pregnancy Associated Plasma Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus tamarii
多孢木霉ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
蘇云金芽胞桿菌NSE (Neuron Specific Enolase) ELISA Kit用途: 用于抗蟲基因的分離和抗蟲相關(guān)基礎(chǔ)研究。
臭曲霉GLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit用途: 糖化酶產(chǎn)生菌
小橢圓接合酵母SP-A (Pulmonary Surfatcant-Associated Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Zygosaccharomyces microellipsoides
歧皺青霉Smad7 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium steckii
葉球鞘氨單胞菌NE (Neutrophil Elastase) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas phyllosphaerae
谷氨酸棒桿菌IL-12/p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
干酪乳桿菌IL-12 (Interleukin 12) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus casei
假單胞菌屬MBP/MBL (Mannma Binding Protein/Mannan Binding Lectin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas sp
微球菌AQP-3 (Aquaporin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus sp.
蘇云金芽孢桿菌松蠋亞種AQP-4 (Aquaporin 4) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枝孢霉通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Phospho-MKP1 (Ser318) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗體X-gal(20mg/ml)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ACTH (18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體褐煤酸Octacosanoic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C28H56O2 分 子 量: 424.74304
ACTH (7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)抗體3-羥基-9,10-二甲氧基紫檀烷;美迪紫檀素methyl-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C37H61NO13 分 子 量: 727.87914
Actin α/alpha-SMA 肌動(dòng)蛋白α(α-SMA)抗體高香草酸硫酸鹽Benzeneacetic acid,3-methoxy-4-(sulfooxy)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C9H10O7S 分 子 量: 262.2365
Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2 α橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白/α-SCA抗體L-賴氨酸L-Lysine化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H14N2O2 分 子 量: 146.18756
alpha Actinin 4 α-輔肌動(dòng)蛋白4抗體二乙酸丁香樹脂醇酯Syringaresinol diacetate對(duì)照藥材 分 子 式: C26H30O10 分 子 量: 502.5104
F-Actin 纖維狀肌動(dòng)蛋白抗體關(guān)附甲素Hetisan-2,11,13,14-tetrol,2,13-diacetate, (2a,11a,13R)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C24H31NO6 分 子 量: 429.50604