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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3451
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3451 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
諾氏梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Clostridium novyi | LZR3451 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
巴氏醋桿菌CLU (Clusterin) ELISA Kit拉丁屬名: Acetobacter pasteurianus
蠟狀芽孢桿菌FⅡ(Coagulation Factor Ⅱ)ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
委內(nèi)瑞拉鏈霉菌FⅢ (Coagulation Factor Ⅲ) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces venezuelae Ehrlich et al.
麗齒菌屬FⅩ (Coagulation Factor Ⅹ) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鹽古桿菌FⅩⅢ (Coagulation Factor ⅩⅢ) ELISA Kit拉丁屬名: Halobacterium sp.
分枝節(jié)桿菌FⅫ (Coagulation Factor Ⅻ) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter ramosus
匍枝根霉(黑根霉)FIX (Coagulation Factor IX) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus stolonifer
腸沙門氏菌腸亞種FV (Coagulation Factor V) ELISA Kit 拉丁屬名: Salmonella enterica subsp. enterica
戊糖片球菌CFL1 (Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit拉丁屬名: Pediococcus pentosaceus
扣囊復膜孢酵母CFL2 (Cofilin 2, Muscle) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera
紅曲霉COL1 (Collagen Type Ⅰ) ELISA Kit 用途: 用于 紅曲米
尖針芽孢酵母COL2 (Collagen Type Ⅱ) ELISA Kit拉丁屬名: Aciculoconidium aculeatum
鏈霉菌屬COL3 (Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces sp.
氧化微桿菌COL4 (Collagen Type Ⅳ) ELISA Kit 拉丁屬名: Microbacterium oxydans
臘狀芽胞桿菌COL1α2 (Collagen Type I Alpha 2) ELISA Kit 用途: 產(chǎn)谷氨酸
諾氏梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CRLF2 胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素受體抗體腺嘌呤1H-Purin-6-amine中藥標準品 分 子 式: C5H5N5 分 子 量: 135.1267
ASB10 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族10抗體牡丹皮苷CMudanpioside C中藥標準品 分 子 式: C30H32O13 分 子 量: 600.56728
MARK4 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK4抗體異歐前胡素isoimperatorin中藥標準品 分 子 式: C16H14O4 分 子 量: 270.28
phospho-MARK4(Ser423) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK4抗體異-羅漢果皂苷 Visomogroside V中藥標準品 分 子 式: C60H102O29 分 子 量: 1287.43448
phospho-TCF3/E2A/E47(Ser39) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體貝母素乙Peiminine中藥標準品 分 子 式: C27H43NO3 分 子 量: 429.64
IgHV/IgH 免疫球蛋白重鏈可變區(qū)抗體二氫異丹參酮IDihydrotanshinone化學標準品 分 子 式: C18H14O3 分 子 量: 278.30196
Mammaglobin A 乳腺珠蛋白1抗體(-)-紫堇明(-)-Corlumine對照藥材 分 子 式: C21H21NO6 分 子 量: 383.39454
