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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3455
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-12
- 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3455 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
敗血梭狀芽胞桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Clostridium septicum | LZR3455 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
枯草芽孢桿菌TPS (Tryptase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
綠僵菌CREB (Cyclic AMP Response Element Binding Protein) ELISA Kit 用途: 害蟲生物防治
熱帶假絲酵母CDK5( Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida tropicalis
爪哇毛霉CDK9 (Cyclin Dependent Kinase 9) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
嗜腐爛居真菌細(xì)菌CDKN2A (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit 拉丁屬名: Mycetocola saprophilus
茄鏈格孢CCND1 (Cyclin D1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
周雄腐霉CCND2 (Cyclin D2) ELISA Kit拉丁屬名: Pythium periilum
哈茨木霉CCND3 (Cyclin D3) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
水生拉恩氏菌CYPA (Cyclophilin A) ELISA Kit拉丁屬名: Rahnella aquatilis
粉紅單端孢CYPB (Cyclophilin B) ELISA Kit用途: 林病研究
HomoserinimonasCYPD (Cyclophilin D) ELISA Kit拉丁屬名: Homoserinimonas sp.
黃曲霉β-actin (Beta actin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus flavus
枯草芽孢桿菌Cys-C (Cystatin C) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
芽胞桿菌屬CYSLTR2 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
米根霉CYB561 (Cytochrome b-561) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus oryzae
敗血梭狀芽胞桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書ADAM11 去整合素樣金屬蛋白酶11抗體京尼平龍膽雙糖苷Cyclopenta[c]pyran-4-carboxylicacid, 1-[(6-O-b-D-glucopyranosyl-b-D-glucopyranosyl)oxy]-1,4a,5,7a-tetrahydro-7-(hydroxymethyl)-,methyl ester, (1S,4aS,7aS)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C23H34O15 分 子 量:
Histone H3 (Tri Methyl K4) 三甲基化組蛋白H3抗體異甘草苷ISOLIQUIRITIN中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H22O9 分 子 量: 418.39
MAGEA11 相關(guān)抗原11抗體表沒食子兒茶素沒食子酸酯(-)-Epigallocatechin gallate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H18O11 分 子 量: 458.38
ADAMTS12 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體紅細(xì)胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ADH/AVP 抗激素/升壓素抗體(和肽素)RNase A(10mg/ml,熱滅活)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
GDF9 生長分化因子9抗體交讓木苷Cyclopenta[c]pyran-4-carboxylicacid, 7-[(acetyloxy)methyl]-1-(b-D-glucopyranosyloxy)-1,4a,5,7a-tetrahydro-5-hydroxy-, methyl ester,(1S,4aS,5S,7aS)-對照藥材 分 子 式: C19H26O12 分 子 量:
ADAM8 去整合素樣金屬蛋白酶8抗體Beta-茄邊堿b-D-Glucopyranoside, (3b,22b,25S)-spirosol-5-en-3-yl O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-O-[6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®4)]-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C45H73NO15 分 子 量: 868.058820000001