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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
敗血梭狀芽胞桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3455
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3455
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

敗血梭狀芽胞桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Clostridium septicum

LZR3455


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

枯草芽孢桿菌TPS (Tryptase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

綠僵菌CREB (Cyclic AMP Response Element Binding Protein) ELISA Kit 用途: 害蟲生物防治

熱帶假絲酵母CDK5( Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida  tropicalis

爪哇毛霉CDK9 (Cyclin Dependent Kinase 9) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

嗜腐爛居真菌細(xì)菌CDKN2A (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit  拉丁屬名: Mycetocola  saprophilus

茄鏈格孢CCND1 (Cyclin D1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

周雄腐霉CCND2 (Cyclin D2) ELISA Kit拉丁屬名: Pythium periilum

哈茨木霉CCND3 (Cyclin D3) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

水生拉恩氏菌CYPA (Cyclophilin A) ELISA Kit拉丁屬名: Rahnella aquatilis

粉紅單端孢CYPB (Cyclophilin B) ELISA Kit用途: 林病研究

HomoserinimonasCYPD (Cyclophilin D) ELISA Kit拉丁屬名: Homoserinimonas  sp.

黃曲霉β-actin (Beta actin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  flavus

枯草芽孢桿菌Cys-C (Cystatin C) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

芽胞桿菌屬CYSLTR2 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.

米根霉CYB561 (Cytochrome b-561) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus  oryzae
敗血梭狀芽胞桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書ADAM11  去整合素樣金屬蛋白酶11抗體京尼平龍膽雙糖苷Cyclopenta[c]pyran-4-carboxylicacid, 1-[(6-O-b-D-glucopyranosyl-b-D-glucopyranosyl)oxy]-1,4a,5,7a-tetrahydro-7-(hydroxymethyl)-,methyl ester, (1S,4aS,7aS)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C23H34O15 分 子 量:

Histone H3 (Tri Methyl K4)  三甲基化組蛋白H3抗體異甘草苷ISOLIQUIRITIN中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C21H22O9 分 子 量: 418.39

MAGEA11  相關(guān)抗原11抗體表沒食子兒茶素沒食子酸酯(-)-Epigallocatechin gallate中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C22H18O11 分 子 量: 458.38

ADAMTS12  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體紅細(xì)胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

ADH/AVP  抗激素/升壓素抗體(和肽素)RNase A(10mg/ml,熱滅活)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

GDF9  生長分化因子9抗體交讓木苷Cyclopenta[c]pyran-4-carboxylicacid, 7-[(acetyloxy)methyl]-1-(b-D-glucopyranosyloxy)-1,4a,5,7a-tetrahydro-5-hydroxy-, methyl ester,(1S,4aS,5S,7aS)-對照藥材 分 子 式: C19H26O12 分 子 量:

ADAM8  去整合素樣金屬蛋白酶8抗體Beta-茄邊堿b-D-Glucopyranoside, (3b,22b,25S)-spirosol-5-en-3-yl O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-O-[6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®4)]-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C45H73NO15 分 子 量: 868.058820000001

 


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