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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

堅強芽孢桿菌SVCAM-1 (Soluble Vascuolar Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus firmus

根瘤菌FLT1/VEGFR1 (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

蘇云金芽孢桿菌LDL-C (low density lipoprotein cholesterol) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus thuringiensis Berliner

枯草芽孢桿菌SSTR1 (Somatostatin Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

三葉草根瘤菌SST (Somatostatin) ELISA Kit用途: 與三葉草共生固氮

紫孢側(cè)耳（美味側(cè)耳）SSFA2 (Sperm Specific Antigen 2) ELISA Kit 用途: 食用

枯草芽孢桿菌SCFR (Stem Cell Factor Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

pQE31SCF (Stem Cell Factor) ELISA Kit拉丁屬名: 宿主：DH5α，BL21

刺毛殼SF1 (Steroidogenic Factor 1) ELISA Kit用途: 水解纖維素(hydrolyzes cellulose)  水解凝膠(hydrolyzes gelatin)  水解淀粉(hydrolyzes starch )

小鼠小短桿菌SREBP (Sterol Regulatory Element Binding Proteins) ELISA Kit拉丁屬名: Brachybacterium  muris

巴斯德畢赤酵母SDF-1 (Stromal Cell Derived Factor 1) ELISA Kit用途: 高效表達、分泌、 葡聚糖酶

釀酒酵母SDF-1β (Stromal Cell Derived Factor 1β) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

大腸埃希菌SDF2 (Stromal Cell Derived Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: coli

德爾布有孢酵母SDF2L1 (Stromal Cell Derived Factor 2 Like Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Torulaspora delbrueckii

乳桿菌屬SDF4 (Stromal Cell Derived Factor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus  sp.
庫蠓通用探針法熒光定量PCR試劑盒 KMT8/Riz1/Riz2  轉(zhuǎn)錄因子GATA3結(jié)合蛋白G3B抗體楊梅苷3-[(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)oxy]-5,7-dihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-4H-benzopyran-4-one中藥標準品  分 子 式: C21H20O12 分 子 量: 464.3763

GLIPR1  腦機制相關(guān)蛋白1抗體甲基正壬酮2-Undecanone中藥標準品  分 子 式: C11H22O 分 子 量: 170.29

RING1  環(huán)指蛋白1抗體甲酸水溶液(10%)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

PIG3/TP53I3  p53誘導(dǎo)蛋白3抗體阿魏酸4-Hydroxy-3-methoxycinnamic acid中藥標準品  分 子 式: C10H10O4 分 子 量: 194.184

PRMT4  組蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶CARM1抗體澳洲茄邊堿b-D-Glucopyranoside, (3b,22a,25R)-spirosol-5-en-3-yl O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-O-[6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®4)]-中藥標準品  分 子 式: C45H73NO15 分 子 量:

TP53I13  蛋白p53誘導(dǎo)蛋白13(抑制基因)吉馬酮(3E,7E)-3,7-Dimethyl-10-(propan-2-ylidene)cyclodeca-3,7-dienone中藥標準品  分 子 式: C15H22O 分 子 量: 218.33458

p53 DINP1  p53誘導(dǎo)核蛋白1抗體異橙皮內(nèi)酯2H-1-Benzopyran-2-one,7-methoxy-8-(3-methyl-2-oxobutyl)-對照藥材 分 子 式: C15H16O4 分 子 量: 260.28514