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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3497
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3497 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鯉病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒 | Cyprinid Herpesvirus(CyHV-III ) | LZR3497 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
梅花狀青霉HDAC1 (Histone Deacetylase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium herquei
黃硬皮馬勃TSH (Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit用途: 外生菌根菌
阿維菌素鏈霉菌COL3α1 (Collagen Type III Alpha 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces avermitilis
枯草芽孢桿菌TEF (Thyrotroph Embryonic Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
絳紅產(chǎn)色小單胞菌TRH (Thyrotropin-Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Micromonospora purpureochromogenes
紅冬孢酵母屬TAB (Thyroxine Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodosporidium sp.
白靈側(cè)耳T4 (Thyroxine) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
Hyalodendriella betulae Crous TJP1 (Tight Junction Protein 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
貪噬菌TFPI (Tissue Factor Pathway Inhibitor) ELISA Kit拉丁屬名: Variovorax boronicumulans
香菇TF (Tissue Factor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
不吸水鏈霉菌TIMP-2 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 2) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有及殺蟲活性。
孟氏假單胞菌TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
枯草芽孢桿菌TIMP-4 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 4) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
相思根瘤菌TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
植物乳桿菌SERP1 (Stress-associated Endoplasmic Reticulum Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
鯉病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒 RIAM/APBB1 interacting protein 1 β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體白桑八醇Alboctalol對照藥材 分 子 式: 分 子 量:
Rab11 ras癌基因家族Rab11蛋白抗體木香烴內(nèi)酯Costunolide中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H20O2 分 子 量: 232.32
RAB2/RAB2A ras癌基因家族Rab2抗體表斷馬錢子甙半縮醛內(nèi)酯1H,3H-Pyrano[3,4-c]pyran-1-one, 5-ethenyl-6-(β-D-glucopyranosyloxy)-4,4a,5,6-tetrahydro-3-methoxy-, (3S,4aS,5R,6S)-對照藥材 分 子 式: C17H24O10 分 子 量: 388.36646
RAB5 ras癌基因家族Rab5蛋白抗體赤芝酸L中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
RAB8 ras癌基因家族Rab8蛋白抗體(原癌基因c MEL)肥牛木素Ceplignan化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
RAB9 ras癌基因家族Rab9蛋白抗體告達(dá)亭苷元Pregn-5-en-20-one,12-[[(2E)-3,4-dimethyl-1-oxo-2-pentenyl]oxy]-3,8,14,17-tetrahydroxy-, (3b,12b,14b,17a)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C28H42O7 分 子 量: 490.62888
RAB20 ras癌基因家族RAB20抗體杠柳毒苷Periplocin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H56O13 分 子 量: 696.82
