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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
節(jié)片代凡探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3503
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3503
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

節(jié)片代凡探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Davainea proglottina

LZR3503


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

紅根須腹菌TNFRSF1A (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1A) ELISA Kit用途: 屬外生菌根菌

南極類芽孢桿菌MDH1 (Malate Dehydrogenase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus antarcticus

芽孢桿菌Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  tarimensis

米串珠鐮孢LEPR (Leptin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium moniliforme var. oryzae

灰平鏈霉菌PCIII (Procollagen III) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces  griseoplanus

需鈉弧菌fT3 (Free Triiodothyronine) ELISA Kit拉丁屬名: Vibrio natriegens

油菜菌核病菌5-HIAA (5-Hydroxyindolacetic Acid) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌FLAP (5-Lipoxygenase Activating Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

圍小叢殼菌PON1 (Paraoxonase 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

平菇—法無孢DNMT1 (DNA Methyltransferase 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌SIRT1 (NAD-dependent protein deacetylase sirtuin-1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

香菇SCUBE1 (Signal Peptide, CUB and EGF-like Domain-containing Protein 1)ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

美澳型核果褐腐病菌FNDC5 (Fibronectin type III domain-containing protein 5) ELISA kit拉丁屬名: Monilinia fructicola

檸檬色小單孢菌GNMT (Glycine N-methyltransferase) ELISA kit拉丁屬名: Micromonospora citrea

Sphingobacterium compostiHSD11β1 (11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1) ELISA kit拉丁屬名: Sphingobacterium composti
節(jié)片代凡探針法熒光定量PCR試劑盒說明書RORG/ROR gamma  維甲酸相關(guān)孤兒受體γ抗體內(nèi)源性親和素-生物素封閉試劑盒標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

AF6/Afadin  絲狀肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體鶴慶五味子辛素Schisanwilsonin H化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式:  分 子 量:

phospho-Afadin(Ser1718)  磷酸化絲狀肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體野馬追內(nèi)酯AEupalinolide B中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C24H30O9 分 子 量: 463.20

TRIM31  環(huán)指蛋白HCG1抗體乙?;惏叵┧醡ethyl (1S,4aS,5R,8aR)-5-[(E)-5-acetyloxy-3-methyl-pent-3-enyl]-4a-methyl-6-methylidene-decalin-1-carboxylate對照藥材 分 子 式: C22H34O4 分 子 量: 362.50296

alpha-L-arabinofuranosidase  果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體9-羥基-13E-賴百當(dāng)烯-15-酸9-Hydroxy-13E-labden-15-oic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H34O3 分 子 量: 322.48216

THRA1  甲狀腺激素受體α1抗體石吊蘭甲素Lysionotin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C18H16O7 分 子 量: 344.31544

THRA1+2  甲狀腺激素受體α1+α2抗體雷公藤新堿8,11-Epoxy-9,12-ethano-11,15-methano-5H,11H-[1,9]dioxacyclooctadecino[4,3-b]pyridine-5,17(18H)-dione,10,13,14,22,23-pentakis(acetyloxy)-12-[(acetyloxy)methyl]-7,8,9,10,12,13,14,15,19,20-decahydro-21-hydroxy-8,18,21-trimethyl-,(8R,9R,10R,11S,12R,13R,14R,15S,18S,21S,22S)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C38H47NO18 分 子 量:

 


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