![]() |
- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3422
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-12
- 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3422 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
雞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Chicken Anemia Virus(CAV) | LZR3422 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
普通變形桿菌SMN1 (Survival Of Motor Neuron 1, Telomeric) ELISA Kit 拉丁屬名: vulgaris
橙鱗傘2SYP (Synaptophysin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
北里胞菌SNAP-25 (Synaptosome Associated Protein 25) ELISA Kit拉丁屬名: Kitasatosporia sp.
羊無漿體(青海海宴株)SYT1 (Synaptotagmin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: ovis
鮑姆針層孔菌SDC4 (Syndecan 4) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽孢桿菌SNCa (Synuclein, Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
鼠李糖乳桿菌TACR1 (Tachykinin Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus rhamnosus
棘孢曲霉TACR2 (Tachykinin Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus aculeatus
釀酒酵母TLN (Talin) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
類阿達(dá)青霉THP (Tamm–Horsfall Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium adametzioides
帶小棒鏈霉菌TDP43 (TAR DNA Binding Protein 43) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces clavuligerus
都柏林克羅諾桿菌都柏林亞種TRACP-5b (Tartrate-Resistant Acid Phosphatase 5b) ELISA Kit拉丁屬名: Cronobacter dublinensis subsp. dublinensis
球孢白僵菌TBP (TATA Binding Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Beauveria bassiana
Sphingomonas abaciTAF1 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas abaci
大腸埃希菌TAF2 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
雞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1 特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體Tafluposide(5R,*R,8aR,9S)-5-[3,5-Dimethoxy-4-(phosphonooxy)phenyl]-9-[4,6-O-[(R)-ethylidene]-2,3-bis-O-(pentafluorophenoxymethylcarbonyl)-beta-D-glucopyranosyloxy]-5,*,6,8,8a,9-hexahydrofuro[3',4':6,7]naphtho[2,3-d][1,3]dioxol-6-one化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C45H35F10O20P 分 子 量: 1116.7052
ADORA1 腺苷A1A受體抗體古倫賓(1R,2S,3S,5S,8R,11R,12R)-5-(3-Furyl)-12-hydroxy-3,11-dimethyl-6,14-dioxatetracyclo[10.2.2.02,11.03,8]hexadec-15-ene-7,13-dione中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H22O6 分 子 量: 358.38508
AMP deaminase 1 腺苷單磷酸脫氨酶1抗體鹽酸普羅托平; 鹽酸藍(lán)堇堿Bis[1,3]benzodioxolo[4,5-c:5',6'-g]azecin-13(5H)-one,4,6,7,14-tetrahydro-5-methyl-, hydrochloride (1:1)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H19NO5.HCl 分 子 量: 389.8295
A2AR/Adenosine A2a receptor 腺苷A2A受體抗體重樓皂苷IPolyphyllin A中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C44H70O16 分 子 量: 855.017000000001
AACT-Alpha1/A1ACT α-1抗胰糜蛋白酶抗體赤芝酸CLucidenic acid C中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H40O7 分 子 量: 476.602
AAK1 AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體橙黃決明素-6-葡萄糖苷中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
Cyp2-j3 細(xì)胞色素P450Ⅱj3抗體丙二酸Malonic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C3H4O4 分 子 量: 104.06146