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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3431
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3431 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
貓嗜衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒說(shuō)明書 | Chlamydophila felis | LZR3431 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
米根霉αHBDH (α-Hydroxybutyrate Dehydrogenase) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus oryzae
金針菇（黃）GLUT1 (Glucose Transporter 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸埃希菌5-LO (Arachidonate 5-Lipoxygenase) ELISA Kit拉丁屬名: coli
pCMV-Gluc12-LO (Arachidonate 12-Lipoxygenase) ELISA Kit規(guī)格: 1ml甘油管1支，20ul質(zhì)粒，一般次日下午
圍小叢殼菌15-LO (Arachidonate 15-Lipoxygenase) ELISA Kit拉丁屬名: Glomerella cingulata
粉色小菇NOS1/nNOS (Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
楚科奇?？凭S爾氏菌BFP (Brain Finger Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Colwellia chukchiensis
豬鏈球菌II型S100A8 (S100 Calcium Binding Protein A8) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
未定德研所菌S100A9 (S100 Calcium Binding Protein A9) ELISA Kit拉丁屬名: Desemzia incerta
黑腐皮殼屬S100A10 (S100 Calcium-binding Protein A10) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
弗氏檸檬酸桿菌PLA2G2D (Phospholipase A2, Group IID) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母cPLA2 (Phospholipase A2, Cytosolic) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
淺玫瑰鏈霉菌iPLA2 (Phospholipase A2, Calcium Independent ) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces roseolus
楊鏈格孢SAA2 (Serum Amyloid A2) ELISA Kit拉丁屬名: Alternaria populi
耶納農(nóng)球菌 RTN4 (Reticulon 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Agrococcus jenensis
貓嗜衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒說(shuō)明書Alpha-ENaC 鈉通道蛋白α ENaC免疫染色一抗稀釋液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
PLAGL2 多形性腺瘤基因樣蛋白2抗體蘆薈苷aloin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H22O9 分 子 量: 418.4
5HTR2C 5-羥色胺受體2C抗體曲札茋苷Piceatannol 3'-O-glucoside化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H22O9 分 子 量: 406.38328
ROM-K/KCNJ1 ATP調(diào)節(jié)鉀離子通道ROM K抗體花椒毒酚7H-Furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one,9-hydroxy-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C11H6O4 分 子 量: 202.16294
Calsequestrin 肌鈣集蛋白/收鈣素抗體馬來(lái)酸Maleic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C4H4O4 分 子 量: 116.07216
Syncytin 1/HERV 合胞素1抗體酸棗仁皂苷BJujuboside B中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C52H84O21 分 子 量: 1045.21
TASK 3/KCNK9 酸敏感性鉀離子通道蛋白抗體9-甲氧基喜樹堿1H-Pyrano[3',4':6,7]indolizino[1,2-b]quinoline-3,14(4H,12H)-dione,4-ethyl-4-hydroxy-9-methoxy-, (4S)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H18N2O5 分 子 量: 378.38
