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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3457
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3457 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
生孢梭菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Clostridium sporogenes | LZR3457 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
錐形赤褶菇2-3CA9 (Carbonic Anhydrase IX) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
威氏芽孢桿菌DHEA-S7 (Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus vedderi
豬絲菌DHEA-S (Dehydroepiandrosterone Sulfate) ELISA Kit拉丁屬名: rhuriopathiae
枯草芽胞桿菌DHEA (Dehydroepiandrosterone) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
希爾青霉DPD (Deoxypyridinoline) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium shearii
畢赤酵母DNASE1 (Deoxyribonuclease I) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蠟狀芽孢桿菌ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
擬枝孢鐮孢Des (Desmin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
污黑腐皮殼DAO (Diamine Oxidase) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
黃硬皮馬勃DKK1 (Dickkopf Related Protein 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
粘帚霉屬DKK2 (Dickkopf Related Protein 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
雙孢蘑菇DLD (Dihydrolipoyl Dehydrogenase) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
費氏中華根瘤菌DLAT (Dihydrolipoyl Transacetylase) ELISA Kit 用途: 產(chǎn)酸，能與我國栽培大豆共生固氮
匿名曲霉DHT (Dihydrotestosterone) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
干草寒冷桿菌DPPⅣ(Dipeptidyl Peptldase Ⅳ) ELISA Kit拉丁屬名: Frigoribacterium faeni
生孢梭菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Podoplanin Protein/gp36 平足蛋白抗體(淋巴管內(nèi)皮細胞蛋白)鼠尾草酚CARNOSOL中藥標準品 分 子 式: C20H26O4 分 子 量: 330.41804
Cathelicidin 抗菌肽CAMP抗體三七素BETA-N-OXALYLAMINO-L-ALANINE中藥標準品 分 子 式: C5H7N2O5- 分 子 量: 175.11948
CD168/RHAMM 透明質(zhì)酸介導細胞游走受體抗體乙酸-[2-(4-辛?；交?]乙酯4-Octanoylphenethyl acetate化學標準品 分 子 式: C18H26O3 分 子 量: 290.39724
polyprotein[Classical swine fever virus, CSFV] 抗豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍耳病病毒抗體肝素鈉溶液(0.5%,62.5KU,無菌)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CSFV/Classical swine fever virus 病毒抗體4-甲氧基水楊醛4-Methoxysalicylaldehyde中藥標準品 分 子 式: C8H8O3 分 子 量: 152.14732
CSFV/Classical swine fever virus 病毒抗體(-)-松脂醇(-)-pinoresinol化學標準品 分 子 式: C20H22O6 分 子 量: 358.385
Integrin beta 6 整合素β6抗體（Integrin β6）核酸助沉劑(Glycogen,5mg/ml)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
