|
- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3478
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3478 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
棒桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Corynebacterium spp. | LZR3478 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
泡盛曲霉NGAL (Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus awamori
惡臭假單胞菌NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas putida
條紋白蟻傘NOX4 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4) ELISA Kit用途: 食用菌
傘枝犁頭霉NADPH (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate) ELISA Kit拉丁屬名: Absidia corymbifera
米曲霉N-ACHR (Nicotinic Acetylcholine Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
炭黑曲霉NT-proBNP (N-Terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
Actinomadura cellulosilyticaPIIINP (N-Terminal Procollagen III Propeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Actinomadura cellulosilytica sp/ nov/
大腸埃希氏菌NFIL3 (Nuclear Factor, Interleukin 3 Regulated) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
河生腸桿菌NF-κB (Nuclear Factor Kappa B)ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter amnigenus
網(wǎng)孢正青霉NF-κB p65(Nuclear Factor-κB P65) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium reticulisporum
白假絲酵母NRIP1 (Nuclear Receptor Interacting Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida albicans
冷溫木拉克酵母NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Mrakia frigida
卡莫納枝芽孢桿菌NUP107 (Nucleoporin 107kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Virgibacillus carmonensis
黑曲霉NUP153 (Nucleoporin 153kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
地霉NUP155 (Nucleoporin 155kDa) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
棒桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格GAS8 生長停滯特異性蛋白8抗體DL-2-氨基丁酸DL-2-Aminobutyric acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C4H9NO2 分 子 量: 103.11976
GTPBP4/CRFG GTP結(jié)合蛋白4抗體（慢性蛋白）老鸛草素Geraniin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C41H28O27 分 子 量: 952.64482
HACE1 E3泛素蛋白連接酶HACE1抗體甲基麥冬高黃酮A4H-1-Benzopyran-4-one, 3-(1,3-benzodioxol-5-ylmethyl)-5,7-dihydroxy-6,8-dimethyl-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H16O6 分 子 量: 340.32674
SMARCA6/HELLS 淋巴特異性解旋酶抗體白頭翁皂苷DLup-20(29)-en-28-oic acid,
3-[(O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1?2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1?4
)]-a-L-arabinopyranosyl)oxy]-23-hydroxy-, (3b,4a)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C47H76O17 分 子 量: 913.09614
SMARCA1/SNF2L 解旋酶SNF2L抗體長春堿衍生物[8,15'-Biaspidospermidine]-3,3'-dicarboxylicacid,2,2',3,3'-tetradehydro-6',7':7,16'-diepoxy-6,15-dihydroxy-16,17-dimethoxy-,dimethyl ester, (*,6b,7a,8a,12R,19a)-(5'a,6'b,7'b,12'R,19'a)-對照藥材 分 子 式: C44H50N4O10 分 子 量:
ACBD6 ?；o酶A結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體CroverinCroverin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H22O6 分 子 量: 370
ACVR1B/ALK4 激活素A受體1B抗體對葉百部堿三氟乙酸鹽中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
