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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

香蕉CRP (C-Reactive Protein) ELISA Kit用途: 植物病原菌

鴨疫里氏桿菌PLG (Plasminogen) ELISA Kit拉丁屬名: anatipestifer

嘴突凸臍蠕孢FBG (Fibrinogen) ELISA Kit用途: 研究

牛布氏菌陽性血清*品（虎紅平板）MYO (Myoglobin) ELISA Kit規(guī)格: 1ml/4000IU

Rhizobium FABP3 (Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle and Heart) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

塔氏糖多孢菌IL-6 (Interleukin 6) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharopolyspora taberi

銅綠假單胞菌PRL (Prolactin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa

大腸埃希菌ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: coli

金黃殼囊孢BNP (Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物

墳?zāi)构?jié)桿菌FN (Fibronectin) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter tumbae

枯草芽孢桿菌DPT (Dermatopontin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

土曲霉CFP (Complement Factor P) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

燒土正青霉CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium inusitatum

雞縱菌TDGF1 (Teratocarcinoma Derived Growth Factor 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

蘋果錐梗孢PON3 (Paraoxonase 3) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
犬惡絲蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Ryanodine Receptor  心肌蘭尼堿受體抗體（腦肌蘭尼堿受體）Tris緩沖鹽溶液(10×TBS,pH7.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

GCMA/GCM1  絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCMa抗體Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH7.0-9.0,RNase free)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Desmocollin 1  橋粒糖蛋白1抗體等效-6,9-二羥基-15-氧代-16-貝殼杉烯-19-酸ent-6,9-Dihydroxy-15-oxo-16-kauren-19-oic acid對照藥材 分 子 式:  分 子 量:

UACA  葡萄膜自身抗原Uaca抗體黃卡瓦胡椒素B2-Propen-1-one,1-(2-hydroxy-4,6-dimethoxyphenyl)-3-phenyl-, (2E)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H16O4 分 子 量: 284.30654

IL-6  白介素6抗體β-桉葉醇β-Eudesmol化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H26O 分 子 量: 222.37

Caveolin-2  細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體戈米辛GGomisin G 中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C30H32O9 分 子 量: 536.56968

AFP(A2)  甲胎蛋白單克隆抗體（包被）吳茱萸總堿中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式:  分 子 量: