- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3529
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3529 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
犬艾利希體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Ehrlichia canis | LZR3529 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
蘋(píng)果鏈格孢GSTμ2/GSTm2 (Glutathione S Transferase Mu 2, Muscle) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
紅細(xì)菌屬GTC (General Transcription Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodobacter sp.
賴(lài)氨酸芽胞桿菌屬OPGL (Osteoprotegerin Ligand) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus sp.
Bacillus GPRC5A (G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus
假單胞菌屬iPLA2 (Phospholipidase A2, Calcium Independent) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas sp.
釀酒酵母GJβ1 (Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
球孢白僵菌AR (Amphiregulin) ELISA Kit拉丁屬名: Beauveria bassiana
盤(pán)多毛孢CgB (Chromogranin B) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
松口蘑Gp49a (Glycoprotein 49A) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
干環(huán)褶孔菌ACTα1 (Actin Alpha 1, Skeletal Muscle) ELISA Kit 拉丁屬名: Phellinus xeranticus
稻離蠕孢GPLD1 (Glycosylphosphatidylinositol Specific Phospholipase D1) ELISA Kit用途: 教學(xué)科研,分類(lèi)
釀酒酵母PMN Elastase (Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
昆明鏈霉菌PPAR-δ (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Delta) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces kunmingensis
香菇(林研1號(hào))ADAM9 (A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
中間普氏菌OVA sIgG (Ovalbumin Specific IgG) ELISA Kit 拉丁屬名: Prevola intermedia
犬艾利希體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體30-羥基藤黃酸30-Hydroxygambogic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
PI3 Kinase p110 beta 磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體3'-甲氧基-5'-羥基異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
SNX27 SNX27蛋白抗體山竹子素garcinol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C38H50O6 分 子 量: 602.8
TRPV4/TRP12 瞬時(shí)受體電位蛋白12抗體灰葉草素, 羥基魚(yú)藤素3H-Bis[1]benzopyrano[3,4-b:6',5'-e]pyran-7- (7aH)-one,13,13a-dihydro-7a-hydroxy-9,10- dimethoxy-3,3-dimethyl-,(7aR,13aR)- 對(duì)照藥材 分 子 式: C23H22O7 分 子 量: 410.41658
TH/T-H glycoprotein TH糖蛋白抗體野馬追內(nèi)酯K(1E,3beta,4E,6alpha,7beta,8beta)-3-hydroxy-8-[(4-hydroxytigloyl)oxy]germacra-1(10),4,11(13)-trieno-12,6-lactone化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H26O6 分 子 量: 362.417
UHRF1 核蛋白95抗體Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH9.0,RNase free)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
PPP4C 絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶4C抗體白樺脂酸betulinic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H48O3 分 子 量: 456.71