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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
艾利希體屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3534
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3534
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

艾利希體屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格

Ehrlichiae spp.

LZR3534

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

粗皮馬勃SERT (Serotonin Transporter ) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母GLUT2 (Glucose Transporter 2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

紫紅曲霉RAPGEF1 (Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Monascus purpureus

蘇云金芽胞桿菌IκBβ (Inhibitory Subunit of NF Kappa B Beta) ELISA Kit 用途: 用于抗蟲基因的分離和抗蟲相關(guān)基礎(chǔ)研究。

金龜子假絲酵母MAP-2 (Microtubule Associated Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Candida oxycetoniae

水冷源橙色單胞菌6-K-PG (6-Keto-prostaglandin) ELISA Kit拉丁屬名: Aurantimonas  frigidaquae

阿木氏鏈霉菌EPP (Erythrocyte Protoporphyrin) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces almquistii

香菇NT-4 (Neurotrophin 4) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母NUP205 (Nucleoporin 205kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

全食副球菌TNFRSF1A (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1A) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

類產(chǎn)堿假單胞菌CNTN2 (Contactin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas pseudoalcaligenes

啤酒酵母ALD (Aldolase) ELISA Kit用途: 實驗研究

蕈青霉IGF1R (Insulin Like Growth Factor 1 Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium paxilli

草菇AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

PelagibacteriumACP1 (Acid Phosphatase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Pelagibacterium  halotolerans
艾利希體屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格NF-ATc4  T細胞激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體洋川芎內(nèi)酯HSenkyunolide H中藥標準品  分 子 式: C12H16O4 分 子 量: 224.25304

Unc18-3  突觸囊泡融合蛋白Unc18-3抗體蝙蝠葛氰苷(2Z)-2-[(4S,6R)-4-hydroxy-6-[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-1-cyclohex-2-enylidene]acetonitrile中藥標準品  分 子 式: C14H19NO7 分 子 量: 313.30316

caspase-8 subunit p18  半胱氨酸蛋白酶8抗體胰蛋白酶溶液(1%)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

IRAK1  白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體羽扇豆鹼7,14-Methano-2H,11H-dipyrido[1,2-a:1',2'-e][1,5]diazocin-11-one,dodecahydro-, (7S,7aR,14S,14aS)-對照藥材 分 子 式: C15H24N2O 分 子 量: 248.36386

phospho-APE(Ser1417)  磷酸化肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體茜素-1-甲醚9,10-Anthracenedione,2-hydroxy-1-methoxy-化學(xué)標準品 分 子 式: C15H10O4 分 子 量: 254.2375

PRDM1/Blimp1  B淋巴細胞誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體6-羥基山奈酚 3-蕓香糖-6-葡萄糖苷6-Hydroxykaempferol 3-Rutinoside -6-glucoside化學(xué)標準品 分 子 式:  分 子 量:

Dlx1  同源轉(zhuǎn)錄因子DLX1抗體Spinner鹽粉劑(1×,無酚紅)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: 


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