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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3541
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3541 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
內(nèi)阿米巴通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Entamoeba spp. | LZR3541 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
杏鮑菇TECK/CCL25 (Thymus Expressed Chemokine) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
根瘤菌CCND2 (Cyclin-D2) ELISA Kit拉丁屬名: Mesorhizobium chacoense
柔嫩艾美耳球蟲(chóng)TSP-1 (Thrombospondin-1) ELISA Kit拉丁屬名: tenella
Chitinophaga sp.FSHR (Follicle Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Chitinophaga sp.
停滯棒桿菌MOG (Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium stationis
小單孢菌Dyn (Big Dynorphin) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。
細(xì)極鏈格孢菌DPP10 (Dipeptidyl Peptidase X) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母CFI (Complement Factor I) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
婁徹鏈霉菌FOXP3 (Forkhead Box Protein P3) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces rochei
枯草芽孢桿菌RHOA (Ras Homolog Gene Family, Memmber A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
甘薯長(zhǎng)喙殼NUP160 (Nucleoporin 160kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Ceratocystis fimbriata Ellis & Halst.
葡枝根霉TAF1 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus stolonifer
迪吉氏黃桿菌PTGS1 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium degerlachei
斜臥青霉CX26 (Connexin 26) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium decumbens
大腸桿菌CK-17/KRT17 (Cytokeratin 17) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
內(nèi)阿米巴通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 SKALP/Elafin 彈性蛋白酶抑制劑抗體黃杞苷4H-1-Benzopyran-4-one,3-[(6-deoxy-a-L-mannopyranosyl)oxy]-2,3-dihydro-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-,(2R,3R)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H22O10 分 子 量: 434.39338
Epsti1/Epithelial Stromal Interaction 1 上皮間質(zhì)相互作用蛋白1抗體二乙?;蠡ㄐ不▋?nèi)酯1,6-O,O-diacetylbritannilactone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
EIG121 雌激素誘導(dǎo)基因121蛋白抗體2-O-beta-D-吡喃阿洛糖甙-2,16-貝殼杉烯二醇2-16-Kauranediol-2-O-beta-D-allopyranoside對(duì)照藥材 分 子 式: C26H44O7 分 子 量: 468.62336
FAM129A/Cell growth inhibiting gene 39 protein 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制基因39蛋白抗體醉魚(yú)草皂甙IVbuddlejasaponin IV化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C48H78O18 分 子 量: 943.122120000001
FOLH1B 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制蛋白26抗體(特異性膜抗原樣蛋白)東莨菪堿Scopolamine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H21NO4 分 子 量: 303.35
GCET2 中心B淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白2抗體(-)-落葉松脂醇3-Furanmethanol,tetrahydro-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-4-[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]-,(2R,3S,4S)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H24O6 分 子 量: 360.40096
HDGF 衍生生長(zhǎng)因子抗體(高遷移率族蛋白1樣蛋白2抗體)PBS磷酸鹽緩沖液(0.01mol/L,pH7.2-7.4)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: