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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3512
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3512 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
絲狀網(wǎng)尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Dictyocaulus filaria | LZR3512 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
釀酒酵母CD163 (Cluster of Differentiation 163) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大腸埃希氏菌CFD (Complement Factor D) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
Acinetobacter toroneriI-TAC (Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant) ELISA Kit拉丁屬名: Acinetobacter toroneri
蠟狀芽孢桿菌ENG (Endoglin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
瓜類炭疽刺盤孢菌*FABP1 (Fatty Acid Binding Protein 1, Liver) ELISA Kit拉丁屬名: Colletotrichum orbiculare
湘坪鏈霉菌FABP4 (Fatty Acid Binding Protein 4, Adipocyte) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces xiangpingensis
鹽地桿菌IL-1R2 (Interleukin 1 Receptor Type II) ELISA Kit拉丁屬名: Salinibacterium sp.
胡椒枯萎病IL-1R1 (Interleukin 1 Receptor Type I) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
短小芽孢桿菌MCSF (Macrophage Colony Stimulating Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus pumilus
嗜鹽噬冷菌IL-22 (Interleukin 22) ELISA Kit拉丁屬名: Algoriphagus halophilus
薛瓦酵母PL (Pancreatic Lipase) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces chevalieri
小孢擬盤多毛孢IL-12 p35 (Interleukin 12 p35) ELISA Kit拉丁屬名: Pestalotiopsis microspora
水稻節(jié)桿菌CALD (Caldesmon) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter oryzae
膠孢FTH (Ferritin, Heavy Polypeptide) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母IL-19 (Interleukin 19) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
絲狀網(wǎng)尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商SCCA/SERPINB4 絲氨酸蛋白酶抑制劑B4抗體(抗原)羥基積雪草苷Madecassoside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C48H78O20 分 子 量: 975.120920000001
SULT1A1 芳基磺基轉(zhuǎn)移酶1抗體矮陀陀酰胺堿 ABenzamide, N-[(*,20S)-20-(dimethylamino)-4-oxopregn-2-en-3-yl]-對照藥材 分 子 式: C30H42N2O2 分 子 量: 462.66668
TKTL1 酮基移換酶樣蛋白1抗體牛膝甾酮inokosterone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H44O7 分 子 量: 480.63406
PRSS10/TMPRSS2 絲氨酸蛋白酶10抗體大麻色原烯2H-1-Benzopyran-5-ol,2-methyl-2-(4-methyl-3-penten-1-yl)-7-pentyl-對照藥材 分 子 式: C21H30O2 分 子 量: 314.4617
TMPRSS4 膜型絲氨酸蛋白酶2抗體美洲茶酸3'H-Cyclopenta[3,4]-18-norandrost-3-ene-3',13-dicarboxylicacid, tetrahydro-4'-hydroxy-4,5',5',9-tetramethyl-15-(1-methylethenyl)-, (3b,3'b,4a,4'a,5b,8a,9b,10a,13a,14b,15b)-對照藥材 分 子 式: C30H46O5 分 子 量: 486.68324
UEVLD/UEV3 泛素結(jié)合酶E2樣蛋白抗體HEPES緩沖液(10×HMF,無鎂)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
UPP1/Uridine Phosphorylase 1 尿嘧啶核苷磷酸化酶1抗體Perenyi's脫鈣液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
