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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
細(xì)粒棘球探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3523
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3523
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

細(xì)粒棘球探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Echinococcus granulosus

LZR3523

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

謝瓦曲霉D4R/DRD4 (Dopamine Receptor D4) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus chevalieri

表皮葡萄球菌CAMK2α (Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus epidermidis

苛求芽胞桿菌DSG-E1 (Desmogleins 1) ELISA Kit用途: Degrades uric acid

煙管菌PAI1 (Plasminogen Activator Inhibitor 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

節(jié)桿菌MMP-12 (Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter  stackebrandtii

青霉NEF3 (Neurofilament 3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

普利茅斯沙雷氏菌NGAL (Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit拉丁屬名: Serratia  plymuthica

甲型副傷寒沙門氏菌IL-17 (Interleukin 17) ELISA Kit拉丁屬名: Salmonella enterica

窄食單胞菌MYL9 (Myosin Light Chain 9, Regulatory) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

鏈格孢菌PK2 (Prokineticin 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

尖鱗黃傘C/EBPε (CCAAT/Enhancer Binding Protein, Epsilon) ELISA Kit 拉丁屬名: Pholiota squarrosoides (Peck) Sacc.

(疣孢漆斑菌)LDL (Low Density Lipoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Myrothecium verrucaria

硬結(jié)桿菌CASP4 (Caspase 4) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter scleromae

擬盤多毛孢屬RIPK2 (Receptor TNFRSF Interacting Serine Threonine Kinase 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

干草鞘氨單胞菌PDGFA (Platelet Derived Growth Factor Subunit A ) ELISA Kit 拉丁屬名: Sphingomonas faeni
細(xì)粒棘球探針法熒光定量PCR試劑盒說明書FAM107A  下調(diào)蛋白1抗體甘油溶液(75%,無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

FRK/PTK5  胃腸道相關(guān)酪氨酸激酶抗體(蛋白酪氨酸激酶5)乙酰膽堿Ethanaminium,2-(acetyloxy)-N,N,N-trimethyl-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C7H16NO2+ 分 子 量: 146.20744

GANP  中心相關(guān)核蛋白MCM3抗體巴比妥鈉溶液(2%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

GIDRP88  生長抑制和分化相關(guān)蛋白抗體靈芝酸AM1Lanost-8-en-26-oicacid, 3-hydroxy-7,11,15,23-tetraoxo-, (3b)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H42O7 分 子 量:

Gas1  生長休止特定蛋白1抗體二氫桑色素(2R,3R)-2-(2,4-Dihydroxyphenyl)-3,5,7-trihydroxychroman-4-one對照藥材 分 子 式: C15H12O7 分 子 量: 304.25158

MDFIC  肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體科羅索酸corosolic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C30H48O4 分 子 量: 472.69972

MEI-1  減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體草烏甲素Bulleyaconitine A中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C35H49NO9 分 子 量: 627.76

 


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