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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3525
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3525 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鮰愛德華氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Edwardsiella ictaluri | LZR3525 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
馬來西亞鏈霉菌UCP-2 (Uncoupling Protein 2, Mitochondrial) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces malaysiensis
糙皮側(cè)耳C1INH (Complement 1 Inhibitor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
華盛頓腥擲孢菌sFMC (Soluble Fibrin Monomer Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Tilletiopsis washingtonensis
釀酒酵母ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
皺褶青霉SIGLEC1 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium rugulosum
硬桿菌C1r (Complement Component 1R) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter scleromae
杜搟氏菌屬UGCG (UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit拉丁屬名: Duganella phyllosphaerae
枯草芽孢桿菌BACE1 (Beta-site APP Cleaving Enzyme 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
酒色紅菇DAT (Dopamine Transporter) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
淡紫擬青霉EAR1 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
變異鹽單胞菌BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas variabilis
尖孢鐮孢DCLK1 (Doublecortin Like Kinase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Fusarium oxysporum
黑木耳SOCS3 (Suppressors of Cytokine Signaling 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Auricularia auricula
禾生殼二胞Smad7/MADH7 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit用途: 植物病原菌
葡枝根霉SIGLEC10 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 10) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus stolonifer
鮰愛德華氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 LEU5/RFP2 相關(guān)蛋白5抗體順丁稀二酸緩沖液(MAB,pH7.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
SAPK3/MAPK12 應(yīng)激活化蛋白激酶3抗體（絲裂原活化蛋白激酶12）6-羥基-7-甲氧基-4-苯基香豆素;黃檀素6-Hydroxy-7-methoxy-4-phenylcoumarin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H12O4 分 子 量: 268.26408
SCGB3A1 結(jié)合珠蛋白家族3A1抗體MES buffer(0.1mol/L,pH5.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
SEI2/SERTAD2 調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI2抗體綠原酸Chlorogenic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H18O9 分 子 量: 354.31
SIPA1 信號誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1抗體脫氧烏頭堿Aconitane-8,13,14,15-tetrol,20-ethyl-1,6,16-trimethoxy-4-(methoxymethyl)-, 8-acetate 14-benzoate, (1a,6a,14a,15a,16b)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C34H47NO10 分 子 量: 629.73768
AGER 晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體腰果酚(C15:1)3-[(8Z)-pentadec-8-en-1-yl]phenol化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H34O 分 子 量: 302.49406
Fast skeletal Myosin/MRLC2 骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體卡巴他賽Cabazitaxel中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C45H57NO14 分 子 量: 835.93238
