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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3527
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3527 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
遲鈍愛德華菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Edwardsiella tarda | LZR3527 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
尖鐮孢MT (Melatonin) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium oxysporum Schlechtendal
阪崎克羅諾桿菌PEX2 (Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Cronobacter sakazakii
金耳ANGPTL2 (Angiopoietin Like Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Tremella aurantialba Bandoni
解葡聚糖類芽胞桿菌TNNI1 (Troponin I Type 1, Slow Skeletal) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus glucanolyticus
美澳型核果褐腐病菌MMP-25 (Matrix Metalloproteinase 25) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
單增李斯特氏菌GKRP (Glucokinase Regulatory Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Listeria monocytogenes
路德類酵母EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
植物乳桿菌ACA-IgA (Anti-Cardiolipin Antibody IgA) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
放射形根瘤菌SELP (P-Selectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizobium radiobacter
香菇FAS/CD95/TNFRSF6 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
橙黃硬皮馬勃PGF2α (Prostaglandin F2α) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
黑木耳FcεR I (Receptor I for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit用途: 試驗栽培
多主葡萄殼菌FBLN5 (Fibulin 5) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
米曲霉APSA (Anti-Phosphatidyl Serine Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
昆明靈芝D3R/DRD3 (Dopamine Receptor D3) ELISA Kit 用途: 食藥用
遲鈍愛德華菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CHCHD2 NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的基因10蛋白抗體妥帕可卡因8-Azabicyclo[3.2.1]octan-3-ol,8-methyl-, 3-benzoate, (3-exo)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H19NO2 分 子 量:
CHKL/Ethanolamine kinase beta 乙醇胺激酶β抗體瑞枯靈Reticuline中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H23NO4 分 子 量: 329.39022
CHORDC1 含半胱氨酸和組氨酸豐富域蛋白1抗體毛蘭素Phenol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H22O5 分 子 量: 318.36
HIV2 gp36 人類病毒2型抗體（病毒）TEN緩沖液(1×,pH7.2)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
phospho-CDK5(Tyr15) 磷酸化周期素依賴性激酶5抗體球花苦苷b-D-Glucopyranoside,(1aS,1bS,2S,*R,6S,6aS)-1a,1b,2,*,6,6a-hexahydro-6-hydroxy-1a-[[[(2E)-1-oxo-3-phenyl-2-propen-1-yl]oxy]methyl]oxireno[4,5]cyclopenta[1,2-c]pyran-2-yl對照藥材 分 子 式: C23H26O11 分 子 量: 478.44594
MRC2/CD280 巨噬細胞甘露糖受體2抗體銀杏酸C15:0Benzoic acid,2-hydroxy-6-pentadecyl-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H36O3 分 子 量: 348.51944
Tetranectin/CLEC3B/TNA 四連接素TN抗體環(huán)磷酸腺苷Adenosine Cyclophosphate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H12N5O6P 分 子 量: 329.21
