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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
犬附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3570
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3570
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

犬附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格

Eperythrozoon perekropovi

LZR3570


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

類干酪乳桿菌N-MID-OT (N-MID Osteocalcin) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  paracasei

長雙歧桿菌GDF15 (Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit 拉丁屬名: Bifidobacterium  longum

普通層褶菌SGK2 (Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

香菇CA19-9 (Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

橄欖色毛殼F-Box Protein 2(FBXO2) ELISA Kit 拉丁屬名: Chaetomium olivaceum

抗性微桿菌TIEG1 (TGF Beta Inducible Early Response Gene 1) ELISA Kit拉丁屬名: Microbacterium resistens

粉褶環(huán)柄菇DBP (Vitamin D Binding Protein) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌FDP (Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

巨獸芽孢桿菌TAF2 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus megaterium

假單胞菌屬HO2 (Heme Oxygenase 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌GDF11 (Growth Differentiation Factor 11) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

NocardiaCaN (Calcineurin) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardia sp.

枯草芽孢桿菌TMSβ10 (Thymosin Beta 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  subtilis

多粘類芽孢桿菌BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus polymyxa

膠孢LAT (Linker For Activation of T-cell) ELISA Kit用途: 植物病原物,用于種群的遺傳學(xué)研究和炭疽病害的診斷和防治
犬附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格TMEM49  跨膜蛋白49抗體槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷3-O-beta-D-glucopyranosyl-7-O-alpha-L-rhamnopyranoside 3',4',3,5,7-pentahydroxyflavone化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H30O16 分 子 量: 610.518

TMS1/ASC  凋亡相關(guān)斑點樣蛋白ASC抗體野黃芩素Scutellarein中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C15H10O6 分 子 量: 286.24

TPD52/Prostate and colon associated protein  和相關(guān)蛋白貝母素甲Peimine中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C27H45NO3 分 子 量: 431.6511

TPD54/TPD52L2  蛋白D54蛋白抗體異牡荊黃素4H-1-Benzopyran-4-one,6-尾-D-glucopyranosyl-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H20O10 分 子 量: 432.3775

TRIM47  星形細(xì)胞瘤高表達(dá)蛋白抗體(環(huán)指蛋白100)雷公藤春堿3-Furancarboxylic acid,(8R,9R,10R,11S,12R,13R,14R,15S,21S,22S,23R)-10,13,22,23-tetrakis(acetyloxy)-12-[(acetyloxy)methyl]-7,8,9,10,12,13,14,15,17,18,19,20-dodecahydro-18,21-dihydroxy-8,18,21-trimethyl-5,17-dioxo-8,11-epoxy-9,12-ethano-11,15-methano-5H,11H-[1,9]dioxacyclooctadecino[4,3-b]pyridin-14-ylester中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C41H47NO20 分 子 量: 873.806580000001

TSP50  /睪丸抗原20抗體Kodak D-19顯影液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

TULP2/CT65/Cancer testis antigen 65  /睪丸抗原65強Tris鹽緩沖液(pH7.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

 


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