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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
肝片吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3597
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3597
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

肝片吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

Fasciola hepatica

LZR3597

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

交鏈孢菌CXCL16 (Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

白金針21DSP (Desmoplakin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

漏斗狀側耳(鳳尾菇)HCCS (Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit 拉丁屬名: Pleurotus  sajor-caju

假單胞菌GNLY (Granulysin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas   baetica

洋蔥伯克霍爾德氏菌ApoA2 (Apolipoprotein A2) ELISA Kit拉丁屬名: Burkholderia cepacia

不等彎孢TA (Anti-Teichoic Acid Antibody) ELISA Kit用途: 研究

根瘤菌GasR (Gastrin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium herbae

薔薇放線孢*PRSS1 (Protease, Serine, 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Diplocarpon rosae

頂孢頭孢霉REG1α (Regenerating Islet Derived Protein 1 Alpha) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

香菇GPC4 (Glypican 4) ELISA Kit 用途: 應用

齊藤假絲酵母CRHBP (Corticotropin Releasing Hormone Bingding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Candida saitoana

巨大芽胞桿菌REG3γ (Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus megaterium

木賊鐮孢TNX (Tenascin X) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

克雷伯氏菌屬PGR (Progesterone Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Klebsiella  sp.

大腸菌群質控樣品CCL16 (Chemokine C-C-Motif Ligand 16) ELISA Kit規(guī)格: 西林瓶凍干粉
肝片吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 CCDC125  卷曲螺旋結構域蛋白125抗體4-甲基傘形酮(羥甲香豆素)7-Hydroxy-4-methylcoumarin植物激素及核酸類 分 子 式: C10H8O3 分 子 量: 176.17

CCDC37  卷曲螺旋結構域蛋白37抗體山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnoside化學標準品 分 子 式:  分 子 量:

CCDC17  卷曲螺旋結構域蛋白17抗體赤芝酸Dlucidenic acid D中藥標準品  分 子 式: C29H38O8 分 子 量: 514.60722

DCTN1/Dynactin 1  動力蛋白激活蛋白1抗體三萜酸 AMicranoic acid A對照藥材 分 子 式: C22H32O3 分 子 量: 344.48768

SNF1LK2/SIK2  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK2抗體苦蘇花皂苷CLup-20(29)-en-28-oic acid,

3-[[2-O-(6-deoxy-a-L-mannopyranosyl)-a-L-arabinopyranosyl]oxy]-,

O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1?4)-O-b-D-glucopyranosyl-(1?6)-b-

D-glucopyranosyl ester, (3b)-中藥標準品  分 子 式: C59H96O25 分 子 量:

SHARP1/DEC2  轉錄調節(jié)因子DEC2抗體異去氫鉤藤堿Isocorynoxeine中藥標準品  分 子 式: C22H26N2O4 分 子 量: 382.45284

MICB  MHC I類鏈相關蛋白B乙酸鈉緩沖液(0.1mol/L,pH3.6-5.6)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: 


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