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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3588
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3588 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
絲菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Erysipelothrix spp | LZR3588 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
日本曲霉FABP6 (Fatty Acid Binding Protein 6, Ileal) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus japonicus
乳酸乳球菌乳亞種MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp. lactis
釀酒酵母CK-HMW (Cytokeratin High Molecular Weight) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
費(fèi)氏檸檬酸桿菌HLTF (Helicase Like Transcription Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Citrobacter freundii
豌豆根瘤菌fFDFT1 (Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit用途: 與蠶豆、豌豆共生固氮
檸檬明串珠菌Apo A1-Ab (Anti-Apolipoprotein A1 antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Leuconostoc citreum
貝形側(cè)耳COL1α1 (Collagen Type I Alpha 1) ELISA Kit 用途: 食用
釀酒酵母TrxR1 (Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
泡盛曲霉GnRH (Gonadotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus awamori
黑曲霉CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit 用途: 檸檬酸深層發(fā)酵菌
慢生根瘤菌GROα/CXCL1/NAP3 (Growth Regulated Oncogene Alpha) ELISA Kit用途: 與胡枝子共生固氮
狹截盤多毛孢ELA4 (Elastase 4) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
解脂假絲酵母FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida lipolytica
解蛋白奇異球菌CDK1 (Cyclin Dependent Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Deinococcus proteolyticus
南極節(jié)桿菌ES (Endostatin) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter antarcticus
絲菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商MALT1 粘膜相關(guān)淋巴組織轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體IPTG(20%,0.8mol/L)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
NALP12 NALP12抗體糠酸Furan-2-carboxylic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C5H4O3 分 子 量: 112.08346
NALP6 富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體鹽酸吐根堿2H-Benzo[a]quinolizine,3-ethyl-1,3,4,6,7,11b-hexahydro-9,10-dimethoxy-2-[[(1R)-1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimethoxy-1-isoquinolinyl]methyl]-,hydrochloride (1:1), (2S,3R,11bS)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H40N2O4.HCl 分 子 量: 517.09984
NLRP7 富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體苯甲酰烏頭原堿benzoylaconine化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H45NO10.HBr 分 子 量: 684.61234
NLRP9 富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體對(duì)葉百部堿化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
ARMER ARMER抗體雷公藤酚A24,25,26-Trinoroleana-1,3,5(10),7-tetraen-29-oicacid, 2,3-dihydroxy-9,13-dimethyl-6-oxo-, (9b,13a,14b,20a)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H38O5 分 子 量:
HBXIP 病毒X蛋白相互作用蛋白Kodak F-5定影液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
