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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3590
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3590 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
埃希氏菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Escherichia spp. | LZR3590 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
Fusarium venenatum NirenbergBF (Factor B) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium venenatum Nirenberg
短小芽孢桿菌PA2G4 (Proliferation Associated Protein 2G4) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus
草木樨中華根瘤菌TSTA (Tumor Specific Transplantation Antigen) ELISA Kit用途: 固氮
光滑青霉3-NT (3-Nitrotyrosine) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium glabrum
蜂房哈夫尼菌CSF3/GCSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
豌豆根瘤菌GDNF (Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit用途: 共生固氮
香菇EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
孟氏假單胞菌BMP-3 (Bone Morphogenetic Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
麥根腐平臍蠕孢MASP (Mannan Binding Lectin Associated Serine Protease) ELISA Kit用途: 教學(xué)科研
灰葡萄孢菌*fMet (Formylmethionine) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
球孢白僵菌MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Beauveria bassiana
克魯斯假絲酵母SDC1 (Syndecan 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida krusei
桑炭疽刺盤菌RNASE (Ribonuclease) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
乳酸乳球菌乳亞種ANG II R1/AGTR1 (Angiotensin II Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp.lactis
粉擬青霉UBD (Ubiquitin D) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
埃希氏菌屬通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格IFRD1 干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體（神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白PC4）正丁基苯酞;丁基酞內(nèi)酯Butylphthalide中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C12H14O2 分 子 量: 190.23836
PERP/p53 apoptosis effector related to PMP22 p53凋亡相關(guān)作用蛋白PMP22抗體新芒果苷Neomangiferin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H28O16 分 子 量: 584.48022
phospho-GATA-4(ser 262) 磷酸化GATA結(jié)合蛋白4抗體動(dòng)物灌注液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
GPR109A/Puma gamma G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體安石榴甙Punicalagin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C48H28O30 分 子 量: 1084.72
SCN3B 電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體11-去氧澤瀉醇B11-Deoxyalisol B化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H48O3 分 子 量: 456.7
TIS11D/ERF2 表皮生長(zhǎng)因子反應(yīng)蛋白2抗體獐牙菜苷Sweroside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H22O9 分 子 量: 358.34
xCT/CCBR1 鈣離子通道阻端耐藥蛋白CCBR1抗體氯化鈉溶液(1mol/L,無(wú)菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
