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- 品牌：聯(lián)祖
- 產地：進口、國產
- 貨號：LZR3592
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-08
| 產地 | 進口、國產 |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3592 |
| 用途 | 公司產品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
羊闊盤吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | Eurytrema ovis | LZR3592 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數據分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品：
硬桿菌CX40 (Connexin 40) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter scleromae
鞘氨菌COL10 (Collagen Type X) ELISA Kit 拉丁屬名: Sphingobium sp.
*灰葡萄孢FGF6 (Fibroblast Growth Factor 6) ELISA Kit 用途: 進行分析檢測及抗病性鑒定，指導 。
糞腸球菌C1qR1 (Complement Component 1q Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: faecalis
毛霉屬NOS1/nNOS (Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor sp.
弓形蟲(GJS-3株)C5b (Complement Fragment 5b) ELISA Kit拉丁屬名: gondii
北京擲孢酵母GSTs (Glutathione S-Transferases) ELISA Kit拉丁屬名: Sporobolomyces beijingensis
蓋替隱球酵母Ras-GAP1 (Rac-GTPase Activating Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Cryptococcus gattii
淺灰小雙孢菌TNPO1 (Transportin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Microbispora griseola
廣西腐霉UBAP2 (Ubiquitin Associated Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Pythium guangxiense
黑曲霉IL-13 (Interleukin 13) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
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近緣毛殼AATF (Apoptosis Antagonizing Transcription Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Chaetomium subaffine
鞘氨桿菌cPLA2 (Cytosolic Phospholipase A2) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingobacterium sp.
釀酒酵母BECN1 (Beclin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
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KLLN Killin-p53調節(jié)復制抑制蛋白抗體四氫鴨腳木堿TETRAHYDROALSTONINE對照藥材 分 子 式: C21H24N2O3 分 子 量: 352.42686
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Fibrinogen gamma chain 人纖維蛋白原γ鏈抗體EDTA溶液(2%,pH7.0)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Fibrinopeptide B 纖維蛋白肽B抗體（血纖肽B）塔拉薩敏talatisamine中藥標準品 分 子 式: C24H39NO5 分 子 量: 421.57016
Mitochondrial ribosomal protein L11 線粒體核糖體蛋白L11抗體3-羥基-2-甲基-4-吡喃酮3-Hydroxy-2-methyl-4H-pyran-4-one對照藥材 分 子 式: C6H6O3 分 子 量: 126.11004
