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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3620
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3620 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
雞痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | Fowlpox Virus(FPV) | LZR3620 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
圍小叢殼扁圓變種PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
栗疫菌PKCβ1 (Protein Kinase C Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
新城疫病毒MAPτ (Microtubule Associated Protein Tau/Tau Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Newcastle disease virus
尖鐮孢古巴?;?/span>ACTN2 (Actinin Alpha 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
玫瑰色紅球菌IL-5 (Interleukin 5) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodococcus rhodochrous
運動節(jié)桿菌GSTα1 (Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter agilis
Rhizobium multihospitiumLMP7/PSMB9 (Low Molecular-weight Protein/proteasome Beta-type Subunit) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
黑曲霉tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素D型TFR/CD71 (Transferrin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: perfringens Type D
隆紋黑蛋巢NKB (Neurokinin B) ELISA Kit拉丁屬名: Cyathus striatus
Rhizobium alkalisoliPPP1R1A (Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
節(jié)桿菌NUP188 (Nucleoporin 188kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter psychrochitiniphilus
所多瑪鹽紅菌GAL14 (Galectin 14 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Halorubrum sod952ense
山梨木糖假絲酵母ADAM8 (A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA Kit拉丁屬名: Candida sorboxylosa
陽極還原地桿菌VIPR1 (Vasoactive Intestinal Peptide Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Geobacter anodireducens
雞痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒供應商THYN1 胸腺細胞核蛋白1抗體2”-O-沒食子?;鸾z桃苷2'-O-Galloylhyperin中藥標準品 分 子 式: C30H28O15 分 子 量: 628.53432
TIA1 細胞毒顆粒相關蛋白TIA-1抗體朝藿定A1Epimedin A1中藥標準品 分 子 式: C39H50O20 分 子 量: 838.802300000001
NUPR1/p8 核蛋白p8抗體通用強力抗原修復液(10×)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
KIF4A 沉默驅動蛋白KIF4A抗體地膚子皂苷IcMomordin Ic中藥標準品 分 子 式: C41H64O13 分 子 量: 764.93906
PARP3 多腺苷二磷酸多聚酶3抗體/多聚ADP-核糖聚合酶3異類葉升麻苷Isoacteoside中藥標準品 分 子 式: C29H36O15 分 子 量: 624.58714
PARP4 多腺苷二磷酸多聚酶4抗體/多聚ADP-核糖聚合酶45-羥色胺酸2-Amino-3-(5-hydroxy-1H-indol-3-yl)propanoic acid中藥標準品 分 子 式: C11H12N2O3 分 子 量: 220.22458
DOCK1 細胞質(zhì)分裂付出蛋白1抗體去芹-桔梗皂苷D3deapioplatycodin D3化學標準品 分 子 式: C58H94O29 分 子 量: 1255.35