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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3614
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3614 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
禽腺病毒A型探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Fowl Adenovirus(FAdV-A) | LZR3614 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
產(chǎn)黃青霉CYP1A1 (Cytochrome P450 1A1) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
細(xì)纖芽孢桿菌SNRPC (Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide C) ELISA Kit 拉丁屬名: Tenuibacillus
釀酒酵母E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
孟氏假單胞菌DBP (DNA Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
枯草芽孢桿菌CDK9 (Cyclin Dependent Kinase 9) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
亨氏柄桿菌STAT6 (Signal Transducer and Activator of Transcription 6) ELISA Kit 拉丁屬名: Caulobacter henricii
冬蟲夏草AChRab (Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Ophiocordyceps sinensis
產(chǎn)黃青霉MT3 (Metallothionein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
釀酒酵母MBP/MBL (Mannose Binding Protein/Mannose Binding Lectin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
暗黃紫鏈霉菌MYCBP (C-Myc Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces fulvoviolaceus
白綠色球形孢囊菌HTRA1 (HtrA Serine, Peptidase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Sphaerisporangium viridialbum
豇豆慢生根瘤菌AP 17 (Apelin 17) ELISA Kit用途: 其中與山螞蝗等豇豆屬植物共生固氮
梭菌BCAR1 (Breast Cancer Anti Estrogen Resistance 1) ELISA Kit拉丁屬名: septicum
枯草芽孢桿菌Alk-Smase (Alkaline Sphingomyelinase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
節(jié)桿菌COL5α2 (Collagen Type V Alpha 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter sp.
禽腺病毒A型探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格DEDD2 死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體千層塔烯二醇，鋸齒石松烯二醇，山芝烯二醇1H-Cyclohepta[1,2-a:5,4-a']dinaphthalene-3,11-diol,2,3,4,4a,5,6,6a,7,9,9a,10,11,12,13,13a,13b,14,15,15a,15b-eicosahydro-4,4,6a,10,10,13a,15b-heptamethyl-,(3S,4aR,6aS,9aR,11S,13aR,13bS,15aS,15bR)-對照藥材 分 子 式: C30H50O2 分 子 量: 442.7168
DIS/CCAR1 細(xì)胞周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體MES buffer(0.05mol/L,pH8.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
DPF2/D4 zinc and double PHD fingers family 2 雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體巴美靈ATRANORIN對照藥材 分 子 式: C19H18O8 分 子 量: 374.34142
DUSP22/JSP1 雙特異性磷酸酶22抗體雪松醇(+)-cedrol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H26O 分 子 量: 222.37
FKBP38 FK506結(jié)合蛋白38抗體pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖粉劑(pH=7.00)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 叉頭蛋白O1/O3/O4抗體山梨醇溶液(1mol/L,無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
GADD45 gamma 生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ菜籽甾醇Ergosta-5,22-dien-3-ol,(3b,22E)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C28H46O 分 子 量: 398.66424
