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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3633
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3633 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
三線鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Fusarium tricinctum | LZR3633 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
多分枝靈芝PLAP/ALPP (Placental Alkaline Phosphatase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
植物乳桿菌CCR8 (Chemokine C-C-Motif Receptor 8) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
美澳型核果褐腐病菌NSE (Neuron-Specific Enolase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
犁黑輪斑交鏈孢霉GSK3β (Glycogen Synthase Kinase 3 Beta) ELISA Kit用途: 植物病原物，用于該菌種群遺傳學(xué)研究
季也蒙邁耶氏酵母PLA2G12B (Phospholipase A2, Group XII B) ELISA Kit拉丁屬名: Meyerozyma guilliermondii
空腸彎曲桿菌TREM-1 (Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells-1) ELISA Kit拉丁屬名: jejuni
宇佐美曲霉MFI2 (Melanotransferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus usamii
貝氏葡萄座腔菌ACP5 (Tartrate Resistant Acid Phosphatase 5) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
類產(chǎn)堿假單胞菌Thyronine ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas pseudoalcaligenes
釀酒酵母ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
居海綿溶桿菌AGRN (Agrin) ELISA Kit拉丁屬名: Lysobacter spongiicola
毛柄金錢菌(金針菇)AP36 (Apelin 36) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
黃色刺孢鏈霉菌IL-1ra (Interleukin 1 Receptor Antagonist) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces flavospinosporus
總狀共頭霉GBP4 (Guanylate Binding Protein 4) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
環(huán)圈鏈霉菌MMP-10 (Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces anulatus
三線鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒 FLAP/5-lipoxygenase activating protein 5脂氧合酶激活蛋白抗體Spinner鹽溶液(10×,無酚紅)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
IKK alpha + IKK beta KB抑制蛋白激酶α/β抗體7,3'-二羥基-5'-甲氧基異黃酮7,3'-dihydroxy-5'-methoxyisoflavone化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H12O5 分 子 量: 284.263
MC3 Receptor 黑素皮質(zhì)素受體3抗體堪非醇3,4'-二-O-甲醚5,7-Dihydroxy-3-methoxy-2-(4-methoxyphenyl)-4H-chromen-4-one化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H14O6 分 子 量: 314.28946
PDGF AB+BB 血小板源性生長因子AB+BB抗體10-脫乙酰巴卡亭10-Deacetyl Baccatin ￠ó中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H36O10 分 子 量: 544.6
CPLA2 胞漿型磷脂酶A2抗體鄰三聯(lián)苯1,1':2',1''-Terphenyl化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H14 分 子 量: 230.30376
TIRAP 白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白抗體CA緩沖液(pH7.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
phospho-TIRAP(Tyr86) 磷酸化白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白抗體異新藤黃酸Isogambogenic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
