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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
禽病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3639
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3639
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

禽病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Gallid Herpesvirus

LZR3639

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

費(fèi)爾氏酵母GDF7 (Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Fellomyces borneensis

釀酒酵母Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

大毛霉GA (Glycated Albumin) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor mucedo

稻田彎曲嗜酸菌TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces mauvecolor

朱黃籃狀菌ENG/CD105 (Endoglin) ELISA Kit拉丁屬名: Talaromyces minioluteus

膠孢CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

小孢根霉須狀變種AIF1 (Allograft Inflammatory Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. rhizopodiformis

假單胞菌屬L1CAM/CD171 (L1-Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  reinekei

新城疫病毒CTSK (Cathepsin K) ELISA Kit拉丁屬名: Newcastle       disease virus

核盤菌GADL1 (Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

芽胞桿菌GAP43 (Growth Associated Protein 43) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

溶淀粉類芽孢桿菌OC/BGP (Osteocalcin/Bone Gla Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus amylolyticus

岸邊亞硫酸鹽桿菌DβH (Dopamine-β-Hydroxylase) ELISA Kit拉丁屬名: Sulfitobacter litoralis

樟疫霉MDC/CCL22 (Macrophage Derived Chemokine) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

深層大洋芽孢桿菌Preptin ELISA Kit拉丁屬名: Oceanobacillus profundus
禽病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書SPHK2  鞘氨醇激酶2抗體銀線草內(nèi)酯醇Naphtho[2,3-b]furan-2(4H)-one,4a,5,6,7,8,8ahexahydro- 5-hydroxy-3,5,8a-trimethyl-,(4aR,5R,8aR)- 化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H20O3 分 子 量: 248.3175

STK3  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶3抗體康普瑞汀COMBRETASTATIN A-4中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C18H20O5 分 子 量: 316.3484

IKIP  IKK激酶相互作用蛋白抗體新比克白芷內(nèi)酯7H-Furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one,9-[(2- hydroxy-3-methyl-3-butenyl)oxy]-4- methoxy-,(-)- 對照藥材 分 子 式: C17H16O6 分 子 量: 316.30534

AMACR/P504S  α-甲基酰基輔酶A消旋酶抗體10-硝基喜樹堿RUBITECAN化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H15N3O6 分 子 量: 393.35

CASC3/MLN51  易感候選基因3抗體去氫毛鉤藤堿methyl (3beta,16E)-16-(methoxymethylidene)coryn-18-en-17-oate中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C22H26N2O3 分 子 量: 366.45344

phospho-IKKi/IKKe(Thr500)  磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體PBST(1 pH7.4)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

TIAF1  TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1抗體澤渥萜A'-Neogammacerane-6,22-diol,(6a)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H52O2 分 子 量: 444.73268

 


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