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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3639
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3639 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
禽病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Gallid Herpesvirus | LZR3639 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
費(fèi)爾氏酵母GDF7 (Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Fellomyces borneensis
釀酒酵母Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大毛霉GA (Glycated Albumin) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor mucedo
稻田彎曲嗜酸菌TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces mauvecolor
朱黃籃狀菌ENG/CD105 (Endoglin) ELISA Kit拉丁屬名: Talaromyces minioluteus
膠孢CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
小孢根霉須狀變種AIF1 (Allograft Inflammatory Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. rhizopodiformis
假單胞菌屬L1CAM/CD171 (L1-Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas reinekei
新城疫病毒CTSK (Cathepsin K) ELISA Kit拉丁屬名: Newcastle disease virus
核盤菌GADL1 (Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
芽胞桿菌GAP43 (Growth Associated Protein 43) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
溶淀粉類芽孢桿菌OC/BGP (Osteocalcin/Bone Gla Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus amylolyticus
岸邊亞硫酸鹽桿菌DβH (Dopamine-β-Hydroxylase) ELISA Kit拉丁屬名: Sulfitobacter litoralis
樟疫霉MDC/CCL22 (Macrophage Derived Chemokine) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
深層大洋芽孢桿菌Preptin ELISA Kit拉丁屬名: Oceanobacillus profundus
禽病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書SPHK2 鞘氨醇激酶2抗體銀線草內(nèi)酯醇Naphtho[2,3-b]furan-2(4H)-one,4a,5,6,7,8,8ahexahydro- 5-hydroxy-3,5,8a-trimethyl-,(4aR,5R,8aR)- 化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H20O3 分 子 量: 248.3175
STK3 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶3抗體康普瑞汀COMBRETASTATIN A-4中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H20O5 分 子 量: 316.3484
IKIP IKK激酶相互作用蛋白抗體新比克白芷內(nèi)酯7H-Furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one,9-[(2- hydroxy-3-methyl-3-butenyl)oxy]-4- methoxy-,(-)- 對照藥材 分 子 式: C17H16O6 分 子 量: 316.30534
AMACR/P504S α-甲基酰基輔酶A消旋酶抗體10-硝基喜樹堿RUBITECAN化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H15N3O6 分 子 量: 393.35
CASC3/MLN51 易感候選基因3抗體去氫毛鉤藤堿methyl (3beta,16E)-16-(methoxymethylidene)coryn-18-en-17-oate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H26N2O3 分 子 量: 366.45344
phospho-IKKi/IKKe(Thr500) 磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體PBST(1 pH7.4)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
TIAF1 TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1抗體澤渥萜A'-Neogammacerane-6,22-diol,(6a)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H52O2 分 子 量: 444.73268