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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3649
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3649 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
血球鏈菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Globicatella sanguinis | LZR3649 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
嗜腳動物咸海鮮球菌Monkey dDAVP (1-Desamino-8D-Arginine Vasopressin) ELISA Kit拉丁屬名: Jeotgalicoccus pinnipedialis
硝酸鹽還原嗜鹽堿桿菌Monkey TARC (Thymus Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit拉丁屬名: Natronobacterium nitratireducens
棲土曲霉Monkey ACO1 (Aconitase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus terricola
矩圓黑盤孢Monkey α-EP (α-Endomorphin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
孤島海桿狀菌Monkey ERK1 (Extracellular Signal Regulated Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Marinobacter gudaonensis
嗜松籃狀菌Monkey SPTAN1 (Alpha-Fodrin) ELISA Kit 拉丁屬名: Talaromyces pinophilus
環(huán)狀芽胞桿菌Monkey Methylase ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus circulans
植物乳桿菌植物亞種Monkey DPD (Deoxypyridinoline) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum
黑曲霉Monkey NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
*櫻桃鏈格孢Monkey KERA (Keratocan) ELISA Kit拉丁屬名: Alternaria cerasi Potebnia
球孢白僵菌Monkey VE-Cadherin (Vascular Endothelial Cadherin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
亞歷山大富鹽菌Monkey CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Haloferax alexandrinus
爪哇根霉Monkey GHAb (Anti-Growth Hormone Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus javanicus
黑曲霉Monkey PGF (Placental Growth Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
栗疫菌Monkey ANGPTL1 (Angiopoietin Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
血球鏈菌探針法熒光定量PCR試劑盒 TMUB1 跨膜和泛素樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體香紫蘇二醇1-(2-Hydroxyethyl)-2,5,5,8a-tetramethyldecahydronaphthalen-2-ol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H30O2 分 子 量: 254.4082
NUP50 核孔蛋白50抗體5-羥基-4-甲氧基鐵屎米酮Nigakinone對照藥材 分 子 式: C16H12N2O3 分 子 量: 280.27808
PDCD2L/MGC13096 程序性細胞死亡2抗體楮樹黃酮醇F4H-1-Benzopyran-4-one,3,5,7-trihydroxy-2-[4-hydroxy-3-(3-methyl-2-buten-1-yl)phenyl]-8-(3-methyl-2-buten-1-yl)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H26O6 分 子 量:
SLTM 轉(zhuǎn)綠調(diào)節(jié)因子SLTM抗體桑辛素 M5-(6-hydroxy-1-benzofuran-2-yl)benzene-1,3-diol化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C14H10O4 分 子 量: 242.2268
GPR65 G蛋白偶聯(lián)受體65抗體草酸洗液(10%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
AX2R/LOC389289 膜粘連蛋白2受體抗體丹參新醌B2-Isopropyl-3-hydroxy-8-methyl-phenanthrachinon-(1.4)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H16O3 分 子 量: 280.318
NADE/NGFRAP1 神經(jīng)生長因子受體相關(guān)蛋白1抗體龍膽黃堿6-methyl-1-oxo-3,4,6,7-tetrahydro-1H-pyrano[3,4-c]pyridine-5-carbaldehyde化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H11NO3 分 子 量: 193.19924
