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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3673
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3673 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
單孢子蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Haplosporidium spp. | LZR3673 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
松鼠葡萄球菌Monkey GSP (Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus sciuri
Pseudomonas batumici Monkey APAF-1 (Apoptosis Protease Activating Factor-1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
少孢哈薩克斯坦酵母Monkey Aβ1-40 (Amyloid Beta Peptide 1-40) ELISA Kit拉丁屬名: Kazachstania exigua
玫煙色棒束孢Monkey C3bR (Complement Fragment 3b Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Isaria fumosorosea
Bacillus sp.Monkey Dyn (Big Dynorphin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
海假交替單胞菌Monkey PLSCR2 (Phospholipid Scramblase 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudoalteromonas marina
多主葡萄殼菌Monkey HYOU1 (Hypoxia Up Regulated 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
芽胞桿菌Monkey AIG1 (Androgen Induced Protein 1) ELISA Kit 用途: 分類、研究，具有處理富營(yíng)養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力。
多粘類芽孢桿菌Monkey COL15 (Collagen Type XV) ELISA Kit 拉丁屬名: Paenibacillus polymyxa
金黃色葡萄球菌金黃亞種Monkey CD40L/TNFSF5 (Cluster of Differentiation 40 Ligand) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp. aureus
釀酒酵母Monkey EIPS2 (Estrogen Induced Protein pS2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
枯草芽孢桿菌Monkey F12 (Coagulation Factor Ⅻ) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
雞新城疫病毒血凝抑制試驗(yàn)（HI）陽(yáng)性血清Monkey COLEC11 (Collectin Sub-Family Member 11) ELISA Kit規(guī)格: 2ml
黑曲霉Monkey TAF2 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
黃桿菌Monkey Grb2 (Growth Factor Receptor Bound Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium sp.
單孢子蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 NEK8 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK8抗體芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷-6'-乙酯7-O-beta-D-Glucuronoside,Et ester-4',5,7-Trihydroxyflavone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C23H22O11 分 子 量: 474.414
NSP5 核結(jié)構(gòu)蛋白5抗體CTAB抽提液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
n-Myc 致癌基因n-Myc抗體苦參醇XKushenol X化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H28O7 分 子 量: 440.48562
NUBP1 核苷酸結(jié)合蛋白1抗體改良臺(tái)氏液粉劑(無(wú)鈣)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
NUBP2 核苷酸結(jié)合蛋白2抗體卵黃鹽水標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
NUP37 核孔蛋白Nup37抗體3-乙酰基-beta-乳香酸3-Acetyl-尾-boswellic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H50O4 分 子 量: 498.737
PARD6B 缺陷性分配同源物β抗體10-去乙酰紫杉醇;7-表-去乙?；仙即糄eacetyltaxol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C45H49NO13 分 子 量: 811.87
