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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3693
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3693 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
單純病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒 | Herpes Simplex Virus(HSV) | LZR3693 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
大肥菇Monkey GZMK (Granzyme K) ELISA Kit拉丁屬名: Agaricus bitorquis
慢生根瘤菌Monkey TMPRSS2 (Transmembrane Protease, Serine 2) ELISA Kit 用途: 與花生共生固氮良好
球孢白僵菌Monkey MYD88 (Myeloid Differentiation Factor 88) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
解淀粉鹽盒菌Monkey ALCAM (Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit拉丁屬名: Haloarcula amylolytica
香菇Monkey BMPR2 (Bone Morphogenetic Protein Receptor II) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinula edodes
異常漢遜酵母異常變種Monkey TNNC2 (Troponin C Type 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Hansenula anomala var. anomala
榮州假黃單胞菌Monkey TSH (Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudoxanthomonas yeongjuensis
釘斑鏈霉菌Monkey AChRab (Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces clavifer
赭蓋紅菇Monkey FGF9 (Fibroblast Growth Factor 9) ELISA Kit 用途: 可食用,與松、云杉等樹木形成外生菌根
球孢枝孢Monkey TPS (Tissue Polypeptide Specific Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Cladosporium sphaerospermum
芽枝狀枝孢Monkey IgG1 (Immunoglobulin G1) ELISA Kit拉丁屬名: Cladosporium cladosporioides
金黃色葡萄球菌 Monkey PDHα (Pyruvate Dehydrogenase Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus aureus
新月彎孢Monkey Anti-AChR (Anti-Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Curvularia lunata
釀酒酵母Monkey ARHGDIα (Rho GDP Dissociation Inhibitor Alpha ) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
耐賴氨酸芽孢桿菌Monkey CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus boronitolerans
單純病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒 TPTE /睪丸抗原44抗體愈創(chuàng)甘油醚3-(2-Methoxyphenoxy)-1,2-propanediol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H14O4 分 子 量: 198.22
ALDH16A1 乙醛脫氫酶16家庭A1抗體莫諾苷Morroniside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H26O11 分 子 量: 406.38
ALG11 天門冬酰胺連接糖基化11抗體矢車菊素-3-O-葡萄糖苷Cyanidin-3-glucoside chloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H21ClO11 分 子 量: 484.84
ALS2CR4 肌萎縮側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體當(dāng)歸酸酐2-Butenoic acid,2-methyl-, anhydride, (2Z,2'Z)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H14O3 分 子 量: 182.21636
AMIGO3 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體脫氫雌馬酚3-(4-Hydroxyphenyl)-2H-chromen-7-ol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H12O3 分 子 量: 240.25398
AMN1 細(xì)胞核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體Earle's平衡鹽粉劑(1×EBSS,無鈣鎂糖酚紅)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ANKRD11 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體慶大霉素硫酸鹽Gentamycin Solution化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H43N5O7.H2O4S 分 子 量: 575.6739